480-36-4 / 蒙花苷的作用

背景^[1][2]

野菊花（FlowerofIndianDendranthema,Wild chrysanthemum）為菊科多年生草本植物野菊的頭狀花序，外形與菊花相似。產品以色黃無梗、完整、氣香、花未全開者為佳。野菊花可廣泛用于治療疔瘡癰腫、咽喉腫痛、風火赤眼、頭痛眩暈等病證。同時又有很好的降壓作用，可用于高血壓病的輔助治療。

蒙花苷是野菊花的特征性化學成分，也是野菊花中活性最高的黃酮類成分，分子式為C₂₈H₃₂O₁₄，分子量為592.54，屬于Flavonoids黃酮類，基于蒙花苷是野菊花的特征性化學成分，因此，如果能以蒙花苷作為該藥材及其相關制劑的質量評價指標，既能較真實地反映其質量又具有專屬性，可對野菊花藥材及其制劑的質量控制起到重要作用。

目前有關于野菊花中蒙花苷提取方法主要涉及回流提取法、堿提醇沉法等方法，純化方法主要涉及高效制備液相色譜法、大孔吸附樹脂等方法。例如一種從野菊花中分離得到蒙花苷單體的方法，具體實驗方案為：將野菊花藥材用乙醇溶液回流提取，收集濾液，將濾液濃縮后靜置析晶并烘干沉淀，將沉淀以甲醇進行超聲波洗滌，過濾，收集過濾固體，烘干，經烘干后的固體中，加入有機溶劑溶解，過濾，收集濾液，經高效制備液相色譜分離，針對性收集蒙花苷單體的制備餾分溶液，得蒙花苷單體溶液，蒙花苷單體析出后經干燥得到蒙花苷單體產品。

該方法需經制備液相色譜分離，操作復雜，成本較高，很難進行大量制備。還有研究提供了一種從野菊花中分離得到蒙花苷單體的方法，該方法工藝復雜，需要加入酸堿，容易破壞化合物結構，需經大孔吸附樹脂，費時費溶劑，且結晶收率低。就現有技術而言，還需對從野菊花中提取分離蒙花苷工藝進行改進，才能很好地滿足實際生產需求。

結構

藥理作用及應用^[3][4][5]

蒙花苷，其英文名為Linarin，屬于黃酮類化合物。蒙花苷具有抗金黃色葡萄球菌和溶血性鏈球菌、抗衰老作用、抗缺氧作用、抗不良刺激作用、對機體雙向調節作用、抗疲勞作用、抑制血糖升高作用、毒性及致突變性致畸方面的研究、對學習記憶影響作用。

蒙花苷具有非常廣泛的生理和藥理活性，對預防糖尿病和改善糖尿病有顯著的作用還具有抑制磷酸二酯酶、醛糖還原酶、金黃色葡萄球菌、乙型溶血鏈球菌、抗菌等作用，能保護肝臟，并對慢性氣管炎有一定療效。如蒙花苷能降低高血糖小鼠血糖，同時可改善糖尿病小鼠的糖耐量、降低糖尿病小鼠血清丙二醛、總膽固醇及甘油三酯的含量，且無毒副作用，因此蒙花苷可用于糖尿病、高血脂相關的藥物、食品或食品及藥物組合物。

此外還可以利用蒙花苷制備其他化合物，如酶法水解蒙花苷制備金合歡素，金合歡素是野菊花中一種高活性的苷元成分，在野菊花中含量非常低，絕大部分都以其糖苷形式存在，故從植物中直接抽提并不是有利的工業制備方法。蒙花苷是金合歡素的二糖苷，在野菊花、菊花、密蒙花等中草藥中含量較高，兩者區別在于金合歡素的C-7位上連接了一分子6-脫氧-α-L-吡喃鼠李糖基-(1 →6)-β-D-葡萄吡喃糖。

盡管目前通過水解蒙花苷制備金合歡素的案例較少，但是這也可能成為一種制備金合歡素的有效途徑。方法包括制備粗酶液、酶解和純化步驟，具體為：1)粗酶液的制備：將纖維化纖維細菌接種于液體培養基中，30℃培養40h，9000g離心10min后取上清，進行硫酸銨沉淀，收集20％-40％的組分，用緩沖液重新溶解即得；2)酶解：以蒙花苷為原料，利用溶解后的粗酶液對其轉化，使7位的β-D- 葡萄糖苷鍵被水解得到金合歡素.

具體方法為：取蒙花苷置于反應瓶中，按照10：1：2：0.1的體積比加入緩沖液、助溶劑、粗酶液與激活劑后共孵育；反應體系中蒙花苷濃度為0.1-0.5mM，緩沖液為20-50mM，助溶劑的濃度為2-10 mM，酶量為5-10mg/ml，激活劑濃度為2-20mM，pH值為5.0-11.0，反應溫度為20-40℃，反應時間為1-6h；3)金合歡素的制備：待反應結束后，將上述轉化液與2倍體積的甲醇混合，加熱至60度重復提取3-5次，收集提取液冷卻結晶即得到金合歡素。

制備^[7][6]

方法1：一種從野菊花中提取蒙花苷的方法，包括以下步驟：步驟1：將野菊花粉碎并過三號篩后與硅藻土混合，野菊花和硅藻土的重量比為1:1；步驟2：采用ASE萃取法萃取蒙花苷，收集萃取液，其中，ASE萃取法所采用的萃取溶劑為甲醇.

步驟2包括以下子步驟：S1：在萃取池的底部墊3-6張濾紙，再加入硅藻土作為底層；S2：向萃取池中加入步驟1所得到的野菊花和硅藻土的混合物；S3：向萃取池中加入適量的硅藻土作為表層；S4：采用甲醇進行萃?。黄渲校腿禐椋狠腿囟?00℃；循環次數2次；靜態萃取時間10min；沖洗體積100％；吹掃時間60s；步驟3：將萃取液進行離心分離得到含有蒙花苷的上清液。

方法2：一種蒙花苷單體的分離純化方法，包括如下工藝步驟：

1）提取：將野菊花藥材粉碎成直徑3mm的粗粉，按照藥材重量:乙醇溶液體積=1Kg:10L計算，加入體積百分比為95%的乙醇溶液，回流提取3～4次，每次2小時，過濾，收集、合并濾液；經乙醇回流提取得到的提取液即濾液中主要含有蒙花苷、色素和極性類雜質成分。

2）濃縮：將步驟（1）收集、合并的濾液回收乙醇，濃縮至原濾液體積的10%，常溫下靜置析晶10～12小時，過濾收集沉淀，除去濾液，將沉淀60℃烘干后進行下一步洗滌處理；經濃縮后的濾液中主要含有色素和大分子極性類雜質成分。

3）溶劑洗滌：向步驟（2）經烘干后的沉淀中加入10倍量體積的甲醇進行超聲波洗滌，待產品與甲醇成混懸液后用中速濾紙過濾，收集過濾固體，60℃烘干后待下一步處理；經洗滌后的濾液層主要含有色素和小極性類雜質。

4）溶解、過濾：將步驟（3）經烘干后的固體中，按照固體物質量:溶劑體積=1g:10mL，加入有機溶劑溶解，溶解后的溶液用有機膜過濾，濾除顆粒雜質，收集濾液；所述有機溶劑為吡啶、四氫呋喃或DMF。

5）高效制備液相色譜分離：取步驟（4）所得的濾液進樣，用反相高效液相色譜法（RP HPLC）制備分離蒙花苷單體，紫外檢測器在線監測，針對性收集蒙花苷單體的制備餾分溶液，得蒙花苷單體溶液；

主要參考資料

[1] CN201510029603.9一種從野菊花中提取分離蒙花苷工藝

[2] 柴紅玲, 吳林森, 金曉春. 野菊花天然活性成分蒙花苷的提取[J]. 湖北農業科學, 2011, 50(8): 1663-1665.

[3] CN201510029603.9一種從野菊花中提取分離蒙花苷工藝

[4] CN201610989095.3蒙花苷的醫藥保健用途

[5] CN201510451784.4一種酶法水解蒙花苷制備金合歡素的方法

[6]CN201510243008.5從野菊花中提取蒙花苷的方法

[7] CN201210577503.6一種蒙花苷單體的分離純化方法