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537-73-5 / 3-羥基-4-甲氧基肉桂酸的應(yīng)用

背景及概述[1][2]

3-羥基-4-甲氧基肉桂酸中文別名異阿魏酸、3-羥基-4-甲氧基苯丙烯酸。升麻屬植物是毛莨科升麻族植物的主要成員,《中國藥典》(2005年版)收載的常用中藥升麻的原植物有3種即大三葉升麻、興安升麻和升麻,在我國分布區(qū)域廣,資源量大。升麻中含有異阿魏酸、三萜化合物、香豆素等成分,其中異阿魏酸具有解熱、鎮(zhèn)痛、消炎的作用,2010年版《中國藥典》中即規(guī)定以異阿魏酸作為衡量升麻藥材質(zhì)量的指標(biāo)成分。

應(yīng)用[1-3]

異阿魏酸是升麻等中藥材提取物中的主要單體活性成分,具有抗氧化、降血糖的作用。有研究通過膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(Collagen induced arthritis,CIA)的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):異阿魏酸及包含異阿魏酸的中藥(如升麻)對(duì)CIA造成的多發(fā)性關(guān)節(jié)損傷具有保護(hù)作用,能夠明顯降低CIA動(dòng)物模型的發(fā)病率、關(guān)節(jié)炎平均指數(shù)、改善骨結(jié)構(gòu)破壞、降低抗二型膠原抗體和多種炎性細(xì)胞因子的分泌,說明其具有確切的抗關(guān)節(jié)炎癥的作用,可以用來制備治療或緩解類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎癥狀的藥物或保健品。

此外,還有研究觀察阿魏酸和異阿魏酸對(duì)HepG2 細(xì)胞中細(xì)胞色素P450 同工酶1A1、3A4(CYP1A1、CYP3A4)的作用特點(diǎn)。采用MTT 比色法測定不同質(zhì)量濃度阿魏酸和異阿魏酸對(duì)體外培養(yǎng)人肝癌HepG2 細(xì)胞增殖的影響;采用流式細(xì)胞術(shù)測定阿魏酸和異阿魏酸對(duì)HepG2 細(xì)胞周期的影響;實(shí)時(shí)定量PCR 技術(shù)檢測阿魏酸和異阿魏酸處理后CYP1A1、CYP3A4 mRNA的表達(dá);Western blotting 檢測CYP3A4 蛋白表達(dá)。結(jié)果顯示作用48 h 后,阿魏酸和異阿魏酸對(duì)HepG2 細(xì)胞均有抑制作用,且有明顯的劑量依賴關(guān)系;阿魏酸和異阿魏酸(50 μg/mL)均阻滯HepG2 細(xì)胞周期于G2/M 期;阿魏酸和異阿魏酸在不同作用質(zhì)量濃度下均是CYP1A1、CYP3A4 mRNA 的抑制劑;50 μg/mL 阿魏酸和異阿魏酸處理細(xì)胞48 h 后,CYP3A4 蛋白表達(dá)均明顯低于對(duì)照組,相比于對(duì)照組,阿魏酸和異阿魏酸的表達(dá)量分別為0.57、0.39。結(jié)論 阿魏酸和異阿魏酸均能抑制HepG2細(xì)胞的增殖,其機(jī)制之一是影響細(xì)胞周期使其阻滯于G2/M 期,能夠抑制藥物代謝酶CYP1A1、CYP3A4 mRNA 的表達(dá),同時(shí)抑制CYP3A4 的蛋白表達(dá),但作用程度差別較大,可能與其羥基和甲氧基異構(gòu)有關(guān)。

此外,異阿魏酸還可用作醫(yī)藥中間體,如制備3,4-二氫-4-芳基香豆素類化合物。3,4-二氫-4-芳基香豆素類化合物作為4-芳基香豆素的氫化衍生物,具有與其相似的生物活性、研究表明4-(4'-羥基苯基)-5,7-二羥 基-8-烷基-3,4-二氫香豆素具有雌激素樣作用。如4-(3'-羥基-4'-甲氧基苯基)-7,8-二羥基-3,4-二氫香豆素的制備的制備如下:在100ml的三口反應(yīng)瓶中,加入0.97g(5mmol)3-羥基-4-甲氧基苯基丙烯酸(異阿魏酸),0.69g(5.5mmol)鄰苯三酚,10ml(98mmol)硝基苯,攪拌均勻,加熱至100℃,再加入2g硫酸酸 化的蒙脫土K-10,TLC檢測反應(yīng)進(jìn)程(展開劑:二氯甲烷:甲醇=10:1),10小時(shí)后反應(yīng)完畢,趁熱過濾,濾液中加20ml石油醚,放置一夜自然析晶,抽濾,20ml石油醚洗滌沉淀,乙酸乙酯-石油醚重結(jié)晶,真空干燥箱中干燥得白色純品0.70g,產(chǎn)率46.4%。

制備 [4-5]

方法1:一種ASE方法提取升麻中異阿魏酸的方法,包括以下步:驟:步驟1:將升麻粉碎后,過篩;步驟2:稱取0.5重量份升麻粉,與1重量份石英砂混合均勻待用;步驟3:在預(yù)先放好過濾膜的萃取池中加入適量的石英砂至達(dá)到萃取池的池口;蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取;萃取結(jié)束后得到萃取液;萃取條件為:萃取溶劑為40%甲醇水溶液;萃取溫度120℃;靜態(tài)萃取時(shí)間5min;沖洗體積60%;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)4次;所述的40%甲醇水溶液為甲醇的體積百分?jǐn)?shù)為40%。

方法2: 在100ml的三口反應(yīng)瓶中加入25g(240mmol)丙二酸,30.4g(200mmol)3-羥基-4- 甲氧基苯甲醛,40ml(496mmol)吡啶,2ml(20.4mmol)六氫吡啶,加熱至75℃后回流6h,反應(yīng)完畢,冷卻10min,加入150ml3mol/ml冰鹽酸溶液,放置一夜,抽濾,用1000ml水洗滌沉淀,得到白色粗品。粗品用無水乙醇重結(jié)晶,得白色純品3-羥基-4-甲氧基苯基丙烯酸34.4g,收率 88.6%。

含量測定[6]

一種測定升麻中異阿魏酸含量的方法,依次包括下述步驟:

步驟1:采用ASE法用丙二醇萃取粉碎后的升麻,并收集丙二醇萃取液;其中,所述的步驟1包括下述子步驟:步驟S1:將升麻樣品粉碎,過篩,取0.5g與1g石英砂混合均勻;步驟S2:將步驟S1所得的混合物裝于放有濾膜的10ml ASE萃取池中,并加石英砂至與池口平行;步驟S3:用濃度為20%~40%的丙二醇萃取,并用濃度為20%~40%的丙二醇定 容至50ml,離心,取上清液。

步驟2:采用HPLC法測定丙二醇萃取液中異阿魏酸的含量。

主要參考資料

[1] CN201810607664.2異阿魏酸、含異阿魏酸中藥提取物及升麻的用途

[2] 阿魏酸和異阿魏酸對(duì)HepG2 細(xì)胞增殖及其細(xì)胞色素P450 酶的影響

[3] CN201510931537.4一種3,4-二氫-4-芳基香豆素類化合物的制備方法

[4] CN201610254586.3一種ASE方法提取升麻中異阿魏酸的方法

[5] CN201610495985.9一種4-芳基香豆素類化合物的制備方法

[6] CN201711363285.5一種測定升麻中異阿魏酸含量的方法

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