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替泊沙林是一種同時具有抑制5-脂氧合酶和環(huán)氧合酶作用的有效抑制劑，具有抗炎、治療多種疼痛(手術后、關節(jié))及自身免疫性疾病等多種藥物活性。傳統方法中替泊沙林的合成第一步多采用異丙基氨化鋰、二異丙基氨化鎂或雙(三甲基甲硅烷基)氨化鋰等極易燃燒、危險性很大的堿作為催化劑，并且要求低溫(−78℃)、無水、無氧，反應條件苛刻，因此，找到一種反應條件溫和、產率較高的合成替泊沙林的新方法具有重要意義。
1）替泊沙林的鎮(zhèn)痛活性
由小鼠的扭體反應試驗可以看出，替泊沙林可明顯抑制小鼠因腹腔注射冰醋酸而出現的扭體反應。灌服給藥后，該化合物顯著延緩小鼠首次出現扭體反應的時間及減少1h內的扭體次數。CMC對照組、雙氯酚酸鈉組、替泊沙林1.12、2.24及4.48mg·kg−3試藥組的扭體反應潛伏期分別為3.7、13.0、11.5、12.6和15.1min；與上述組別相對應的1h內小鼠的扭體次數分別為139.0、54.9、73.4、46.8及31.4次。方差分析結果表明：替泊沙林給藥組和CMC對照組間扭體反應潛伏期及1h內小鼠的扭體次數均有顯著性差異(P<0.05)，且替泊沙林可劑量依賴性地延長注射冰醋酸后的扭體反應潛伏期并減少1h內小鼠的扭體次數，替泊沙林對扭體反應的潛伏期及1h內扭體次數的抑制作用和雙氯酚酸鈉無顯著性差異
2）替泊沙林對人結腸癌的抑制作用10只裸鼠皮下接種HT-29人結腸癌細胞建立人結腸癌模型，隨機分為治療組和對照組。治療組以替泊沙林與5%羧甲基纖維素鈉溶液制成的混懸液給藥，對照組不作任何治療。治療期間觀察裸鼠皮下瘤體的生長情況，測算腫瘤體積。治療結束后處死裸鼠并取瘤，測量腫瘤質量，檢測環(huán)氧合酶-2/5-脂氧合酶在腫瘤組織中的表達，用免疫組化方法檢測腫瘤微血管密度，用脫氧核糖核苷酸末端轉移法酶介導的缺口末端標記法(TUNEL)檢測腫瘤細胞凋亡情況。結果10只裸鼠全部成瘤，實驗過程中無裸鼠死亡。實驗結果顯示：替泊沙林可抑制HT-29人結腸癌細胞的生長，可降低環(huán)氧合酶-2/5-脂氧合酶在人結腸癌細胞所致腫瘤組織中的表達水平，對誘導人結腸癌細胞誘導的裸鼠皮下移植瘤具有促進腫瘤細胞凋亡及抑制腫瘤微血管生成作用。結論環(huán)氧合酶-2/5-脂氧合酶雙重抑制劑替泊沙林可能通過促進結腸癌細胞的凋亡、抑制腫瘤微血管生成，從而抑制結腸腫瘤的生長。
1）4-氯-γ，ε-二氧代-苯己酸(1)的合成
將叔丁醇鉀(22.10g，0.20mol)用210mL無水四氫呋喃溶解，制成溶液。在溫度−15～10℃，將對氯苯乙酮(13.40g，0.09mol)溶于30mL四氫呋喃中，在40min內用恒壓漏斗將其滴加到叔丁醇鉀的四氫呋喃溶液中，滴完后反應0.5h。琥珀酸酐(10.51g，0.11mol)溶于170mL四氫呋喃中配成溶液，在溫度−15～10℃下，滴加到上述反應液中，3.5h內滴完。繼續(xù)反應2h。室溫下，用稀鹽酸(40mL)(濃鹽酸∶水=1∶7，體積比)將反應液的pH值調至4～5。將反應液抽濾，濾餅用少量二氯甲烷或者四氫呋喃沖洗，所得濾液減壓蒸去溶劑，得到黃色棉絮狀物質。依次用乙酸乙酯和水沖洗，得白色固體1(12.40g，0.05mol)，收率：56%。mp137～139℃。MS：m/z=277[M+Na]+。1HNMR(CDCl3)δ：2.76～2.83(m，4H，2-CH2，3-CH2)，6.16(s，1H，5-CH2)，7.42～7.44(d，2H，J=7Hz，Ph-H)，
7.78～7.81(d，2H，J=7Hz，Ph-H)，15.70(s，1H，OH)。
2）5-(4-氯-苯基)-1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑-3-丙酸(2)的合成
用甲醇作溶劑合成2將1mL干燥的三乙胺和40mL無水甲醇加入到100mL的燒瓶中，室溫下攪拌5min，然后加入對甲氧基苯肼鹽酸鹽(0.83g，4.75mmol)，繼續(xù)攪拌1h后，加入1(1.02g，4.00mmol)，繼續(xù)反應7h，停止反應。將反應液抽濾，濾液蒸干，得粗品。將粗品溶解到30mL二氯甲烷中，加入20mL水，用分液漏斗分出二氯甲烷，并用二氯甲烷(15mL×3)萃取水相，合并二氯甲烷，用無水硫酸鈉干燥過夜。干燥后過濾，濾液蒸干，用乙酸乙酯重結晶，得純品2(0.99g，1.67mmol)，產率70%。mp125～127℃。MS：m/z=357[M+H]+。1HNMR(CDCl3)δ：2.80～3.08(m，4H，2×CH2)，3.81(s，3H，CH3O)，6.33(s，1H，4-CH)，6.84～6.86(m，2H，Ph-H)，7.11～7.27(m，6H，Ph-H)。
3）5-(4-氯苯)-N-羥基-1-(4-甲氧基苯)-N-甲基-1H-吡唑-3-丙酰胺(替泊沙林)(3)的合成
以二氯甲烷作溶劑合成3將2(6.40g，17.90mmol)用無水二氯甲烷(202mL)溶解，配成溶液備用。將草酰氯(4.08g，32.14mmol)溶于無水二氯甲烷(200mL)，配成溶液，在冰浴冷卻下用恒壓漏斗慢慢滴加到上述2的二氯甲烷溶液中，2h內加完，加完后撤掉冰浴，繼續(xù)在室溫下反應3.5h，停止反應。將反應液在無水條件下蒸干，所得固體物加無水二氯甲烷(100mL)溶解，備用。將N-甲基羥胺鹽酸鹽(2.67g，31.97mmol)、三乙胺(8.85g，87.70mmol)溶于無水二氯甲烷(200mL)配成溶液，在冰浴冷卻下滴加到上述備用液中，4.5h內滴完，繼續(xù)室溫反應14h。反應結束后向反應液內加入蒸餾水200mL，用分液漏斗分出二氯甲烷，二氯甲烷依次用5%稀鹽酸(200mL×2)、飽和食鹽水(200mL×1)洗滌，最后用無水硫酸鈉干燥過夜。干燥后濾去硫酸鈉，減壓蒸去二氯甲烷，得粗品3。粗品用快速色譜柱純化(洗脫液：乙酸乙酯∶石油醚∶三乙胺=20∶20∶1(體積比))，得純品3(3.50g，9.09mmol，產率50%)，mp124～126℃。HR-ESI-MSCalcd.(Found)[C20H20ClN3O3+H]+：386.1302(386.1271)。1HNMR(CDCl3)δ：2.94～3.22(m，4H，2×CH2)，3.17(s，3H，NCH3)，3.84(s，3H，CH3O)，6.32(s，1H，4-CH)，6.87～7.28(m，Ph-H，8H)，10.80(brs，1H，N-OH)。
[1] 替泊沙林的新合成方法及其鎮(zhèn)痛活性的研究
[2] 替泊沙林對裸鼠結腸癌移植瘤的抑制作用
[3] CN200710053988.85-(4-氯-苯基)-N-羥基-1-(4-甲氧基-苯基)-N-甲基-1H-吡唑-3-丙酰胺的合成新方法及藥物用途