10597-60-1 / 羥基酪醇的應(yīng)用

背景^[1]

羥基酪醇具有消炎作用，擴(kuò)張血管和抗菌作用，能夠防止動脈粥樣硬化，能降低某些癌癥(如乳腺、前列腺、子宮內(nèi)膜、消化道)的發(fā)病率；由于羥基酪醇具有很強(qiáng)的抗氧化活性和降低癌癥發(fā)病率的作用，因此具有巨大的醫(yī)療作用前景。研究發(fā)現(xiàn)，橄欖中的各種提取物都具有一定的抑菌特性，通過比較發(fā)現(xiàn)低濃度的羥基酪醇就能夠?qū)Ω锾m式陰性菌產(chǎn)生明顯的抑制作用，這是因?yàn)榱u基酪醇能夠穿透細(xì)菌的細(xì)胞黏膜，分解細(xì)菌黏肽從而引發(fā)細(xì)菌黏膜受損，而橄欖苦苷的抑菌性要明顯弱于羥基酪醇，這可能是因?yàn)殚蠙炜嘬站哂械奶擒战Y(jié)構(gòu)連到羥基酪醇的羥基結(jié)構(gòu)上，從而使其不容易穿透細(xì)菌黏膜，顯示出較弱的抑菌性。

制備^[2]

方法一：

一種羥基酪醇的制備及其快速硝基化的方法：

(1)提取-萃取并行：稱取一定量經(jīng)太陽曬干的油橄欖果渣粉，用集提取-萃取一體化的混合雙相溶劑，油橄欖果渣與溶劑的比例為1:10～50(w/v)，提取溫度為室溫約20-25℃，提取時(shí)間為1～60min，超聲功率為100～1100W的條件下，進(jìn)行超聲波提取-萃取，再用分液漏斗收集溶液的上層即乙酸乙酯層。上述的雙相的極性溶劑為乙醇-水-乙酸乙酯的混合液。

(2)柱分離：將(1)的收集液在25～50℃，150rpm下旋蒸濃縮，得到一定量的濃縮液，經(jīng)硅膠樹脂分離，首先吸附5～10min，用適宜比例的極性混合溶劑洗脫，收集6～8柱體積的目標(biāo)收集液。

(3)旋蒸：將目標(biāo)收集液于25～50℃旋蒸干，其中羥基酪醇的含量可達(dá)90％以上。

(4)硝基化：將收集濃縮的羥基酪醇，與經(jīng)弱酸溶解的NaNO2混合，在室溫下，通過微波輔助作用，反應(yīng)1～8min進(jìn)行快速硝基化，合成4-硝基羥基酪醇。

本發(fā)明中羥基酪醇快速硝基化合成4-硝基羥基酪醇的反應(yīng)式如下：

(5)干燥：將(4)中最后獲得的反應(yīng)液經(jīng)乙酸乙酯萃取，加入無水Na2SO4除水，并在25～50℃下進(jìn)行旋蒸濃縮，進(jìn)行真空干燥，得到的4-硝基羥基酪醇產(chǎn)率可達(dá)90％以上，而含量可達(dá)95％以上。

步驟(1)中所述的提取-萃取并行所用的雙相混合溶劑為乙醇-水-乙酸乙酯混合物，其體積比為1:1:1～2:3:5。

步驟(2)中極性混合溶劑為氯仿-甲醇，比例為9:1～1:1。

步驟(3)中旋蒸條件為：溫度為40～90℃，真空度為0.06～0.09Mpa，轉(zhuǎn)速100～300rmp。

步驟(4)中硝基化過程所使用的羥基酪醇與NaNO2摩爾比為1:2～2:1，微波功率為100～1000W，攪拌速度100～500rpm。

步驟(5)中乙酸乙酯萃次數(shù)為3～5次，每次60～80mL，真空干燥的條件為：溫度25～50℃，真空度0.06～0.1Mpa，時(shí)間12～18h。

方法二：

稱取2.5kg對羥基苯乙醇，溶于100kg0.1MpH＝6.5磷酸鹽緩沖液中，加入5kg抗壞血酸，加入酶液1L(比活500U/mg)，于50℃攪拌反應(yīng)60分鐘，反應(yīng)液通過納濾膜，透析液通過苯乙烯類樹脂柱(約100kg樹脂)，用水洗至流出液用TLC檢測無羥基酪醇斑點(diǎn)，此水洗液濃縮至50kg，用100kg乙酸乙酯萃取5次，乙酸乙酯液濃縮回收溶劑，得2.5kg淡黃色粘稠物，羥基酪醇含量88.3％。

方法三：

取純化的多酚氧化酶液包埋在殼聚糖中用戊二醛交聯(lián)成形，測定其活力50U/mg；取5kg對羥基苯乙醇溶于2000L0.05mol/L磷酸鹽緩沖液(pH值6.5)，加入10kg抗環(huán)酸，攪拌溶解，加入1kg固定化酶，于50℃攪拌反應(yīng)60分鐘，得到的反應(yīng)也用離心法回收固定化多酚氧化酶，將反應(yīng)液通過納濾膜，透析液通過苯乙烯類樹脂柱(約200kg樹脂)，用水洗至流出液用TLC檢測無羥基酪醇斑點(diǎn)，此水洗液濃縮至100kg，用100kg乙酸乙酯萃取5次，乙酸乙酯液濃縮回收溶劑，得4kg淡黃色粘稠物，羥基酪醇含量91.2％。

主要參考資料

[1]許超, 高俊超, 張堅(jiān), & 姜申德. (2010). 羥基酪醇合成工藝研究. 精細(xì)化工, 27(12), 1209-1212.

[2] 金元寶, 黨建章, 代建國, 金剛, & 于化泓. (2011). 羥基酪醇分離純化方法研究進(jìn)展. 食品科技(7), 174-177.

[3] 張小梅. (2008). 羥基酪醇生物學(xué)作用的細(xì)胞與分子機(jī)制研究. (Doctoral dissertation, 大連醫(yī)科大學(xué)).