1406-65-1 / 葉綠素的提取及含量測定

背景及概述^[1][2]

植物體中的一種復雜的有機酸，綠色。植物靠葉綠素進行光合作用制造養料。存在于有機物中的綠色色素，能進行光合作用(photosynthesis)。高級植物含有葉綠素a和b，位于葉綠體(chloroplast)里；葉綠素c見于某些原始海洋植物里，細菌葉綠素出現在有光合作用的細菌里。葉綠素吸收紅光和藍光，捕獲光能用于光合作用。也是茶葉中的主要色素。約占茶葉干重的0.6%，約比胡蘿卜素高四倍，使葉片在正常情況下呈現綠色。

葉綠素a和b都是由4個吡咯環構成的卟啉環、鎂原子和葉綠醇等構成。它們不溶于水，溶于酒精、乙醚、丙酮等有機溶劑。在葉綠體中葉綠素是與層膜上的蛋白質結合在 一起。葉綠素主要吸收紅光和藍紫光。葉綠素a在紅光部分吸收帶比葉綠素b寬，而且偏向長波方面;在藍紫光部分，吸收帶比葉綠素b窄，同時偏向短波方面，因此葉綠素a為藍綠色，葉綠素b為黃綠色。現已知葉綠素b和絕大多數葉綠素a分子吸收的光能，不能直接參加光合作用，而只能傳遞給少數特殊狀態的葉綠素a分子，由它們參加光合作用。

提取^[1]

利用蠶沙提取葉綠素的方法。天然葉綠素的提取過程中多采用浸泡提取，多采用蠶沙浸泡的方式進行提取，由于在浸泡過程中不能對浸泡罐內部的蠶沙進行攪拌，若進行攪拌會將蠶沙打碎造成提取物 料雜質增多，甚至由于雜質含量較高而無法進行使用，現有技術對葉綠素的提取工藝采用酒精、汽油、石油醚、乙醚等單一溶劑或組合溶劑進行提取，提取設備多采用平轉式罐組，該工藝存在兩大缺點，一是以上溶劑或有毒害、或易燃易爆、或提取效果低、或因沸點高而導 致葉綠素破壞，二是采用平轉罐組提取，溶劑流動有死角，提取效率低，原料消耗大，生產成本高。

本發明提供了一種利用提取蠶沙葉綠素的方法，采用丙酮作為溶劑，單罐循環浸泡，溶劑套用的提取工藝，大幅度提高了溶劑利用率和提取效率，降低了溶劑和蠶沙的消耗，降低生產成本，丙酮作溶劑提取效率高，無毒無害，同時丙酮沸點低便于回收，降低生產成本。

CN201610533772.0提供一種利用提取蠶沙葉綠素的方法，其特征在于：包含以下幾個步驟，

A、軟化：將蠶沙平鋪在篩網上，通過噴水管進行噴水濕潤，靜至3-5小時后進行翻堆再噴淋一次，待蠶沙膨脹、疏松；

B、浸泡：將軟化后的蠶沙按規定重量加入浸泡罐，浸泡罐采用多組配合提取，單個浸泡罐加入丙酮進行6次浸泡提取，第1、5、6浸泡用新丙酮或回收丙酮作溶劑，第2、4次浸泡用浸泡罐組其他浸泡罐第5、6次浸泡液做溶劑，第3次浸泡用浸泡罐組其他浸泡罐的第4次浸泡 液做溶劑，單個浸泡罐采用單泵循環的方式進行浸液循環；

C、一次濃縮：對達到濃度的浸泡液進行加溫濃縮，去除浸泡液中的丙酮和部分水分；

D、二次濃縮：對一次濃縮后的浸泡液進行真空加溫二次濃縮去除大部分水分，得到葉綠素成品。

本發明采用丙酮作為溶劑，單罐循環浸泡、多次循環使用浸泡液的工藝，大幅度提高了 溶劑利用率和提取效率，降低了溶劑和蠶沙原料消耗，降低了生產成本，采用單罐循環浸泡工藝，減少溶劑流動死角，大幅度提高了溶劑利用率和提取效率，可降低新丙酮的消耗，通過對蠶沙進行軟化能有效的縮短丙酮對蠶沙的滲透時間，縮短浸提時間。

含量檢測^[3]

CN201510059807.7提供了一種葉綠素含量的檢測裝置及方法，該方法分析速度快、測量范圍廣。

第一方面，本發明提供一種葉綠素含量的檢測方法，包括：利用不同濃度的葉綠素溶液，建立葉綠素檢測模型；采用兩個波長的入射光對待測樣本進行檢測，獲取所述待測樣本的葉綠素的吸光度；將所述待測樣本的葉綠素的吸光度代入所述葉綠素檢測模型，獲取所述待測樣本的葉綠素的濃度。可選的，所述利用不同濃度的葉綠素溶液，建立葉綠素檢測模型，包括：利用兩個波長下的光對不同濃度的標準葉綠素溶液進行檢測；分別計算所述兩個波長的光對應的吸光度值和葉綠素濃度；根據所述吸光度值和所述葉綠素濃度，建立葉綠素檢測模型。

第二方面，本發明還提供了一種葉綠素含量的檢測裝置，包括：模型建立模塊、光電探測模塊和檢測模塊，所述模型建立模塊設置于所述檢測模塊中，所述光電探測模塊與所述檢測模塊相連；所述模型建立模塊，用于利用不同濃度的葉綠素溶液，建立葉綠素檢測模型；所述光電探測模塊，用于采用兩個波長的入射光對待測樣本進行檢測，獲取所述待測樣本的葉綠素的吸光度；所述檢測模塊，用于將所述待測樣本的葉綠素的吸光度代入所述葉綠素檢測模型，獲取所述待測樣本的葉綠素的濃度。

可選的，所述模型建立模塊，具體包括：利用兩個波長下的光對不同濃度的標準葉綠素溶液進行檢測；分別計算所述兩個波長的光對應的吸光度值和葉綠素濃度；根據所述吸光度值和所述葉綠素濃度，建立葉綠素檢測模型。本發明提供的一種葉綠素含量的檢測裝置及方法，該方法分別用波長為645nm和663nm的光照射樣品，通過光電傳感器測量透射光的強度可以得到對應波長下的吸光度值，從而計算出葉綠素的相對濃度值。主要優點是：分析速度快、測量范圍廣、樣品準備簡單、不消耗樣品、沒有化學污染等。

主要參考資料

[1] 中國中學教學百科全書·生物卷

[2]CN201610533772.0 一種利用蠶沙提取葉綠素的方法

[3]CN201510059807.7 一種葉綠素含量的檢測裝置及方法