急性冠脈綜合征（ＡＣＳ）嚴重危害人類健康，應用抗血小板藥物是治療的關鍵步驟之一。血小板糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ受體是血小板血栓形成的最終共同路徑，阻斷這一受體即可有效地抑制各種誘導劑激發的血小板聚集，其拮抗劑成為一類新的、強效的、更合理的治療缺血性心臟病的藥物。大量循證醫學研究證實，血小板糖蛋白ＧＰⅡｂ／Ⅲａ受體拮抗劑能顯著改善ＡＣＳ和經皮冠狀動脈介入術（ＰＣＩ）患者的臨床預后，明顯降低ＡＣＳ患者的死亡率和心血管不良事件的發生率。血小板糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ受體拮抗劑類藥物已開發很多，目前國際上可用于臨床的有３種制劑，阿昔單抗、依替巴肽和替羅非班。國內關于血小板糖蛋白ＧＰⅡｂ／Ⅲａ受體拮抗劑的使用經驗甚少，可供使用的藥物也非常有限，僅有１種藥物即鹽酸替羅非班上市，因而開發新的血小板糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ受體拮抗劑勢在必行。國產酸埃依非巴肽是成都圣諾生物制品有限公司生產的一個血小板糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ受體拮抗劑，本文研究國產酸埃依非巴肽體內、體外對犬血小板聚集的抑制作用及作用特點，為其臨床應用提供實驗依據。

酸埃依非巴肽制備如下：

1）Boc-Pro-Cys(acm)-NH2的合成

在50毫升的圓底燒瓶中加入Boc-Pro-OH(1.076g)，NH2-Cys(acm)-NH2(0.960g)，HOSU(N-羥基琥珀酰亞胺)(0.575g)，用無水DMF40毫升溶解，在冰水浴下加入DCC(1.030g)后，在室溫下攪拌2小時，檢測反應完全。抽濾除去反應產生的沉淀，減壓濃縮除去DMF，之后用大量乙酸乙酯溶解，依次用10％NaHCO3、15％稀鹽酸、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，旋干乙酸乙酯，得到固體1.760g。HPLC純度：大于92％，收率為90.5％MS＝389(M+1)。

2）Boc-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2的合成

稱取Boc-Pro-Cys(acm)-NH2(1.945g)置于50毫升的圓底燒瓶中加入6mol/L的HCl/THF溶液20毫升，在室溫下反應30分鐘，檢測反應完全，減壓濃縮除去HCl/THF溶液，殘留物中加入乙酸乙酯溶解，再減壓濃縮除去乙酸乙酯，如此重復數次，直到除盡HCl。在50毫升的圓底燒瓶中加入Boc-Trp-OH(1.515g)，NH2-Pro-Cys(acm)-NH2(1.445g)，HOSU(0.575g)，用無水DMF40毫升溶解，在冰水浴下加入DCC(1.030g)后，在室溫下攪拌2小時，檢測反應完全。抽濾除去反應產生的沉淀，減壓濃縮除去DMF，之后用大量乙酸乙酯溶解，依次用NaHCO3、稀鹽酸、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，旋干乙酸乙酯，得到固體2.507g。HPLC純度：大于93％，收率為87％MS＝576(M+1)。

3）Boc-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2的合成

稱取Boc-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2(2.880g)置于50毫升的圓底燒瓶中加入6mol/L的HCl/THF溶液20毫升，在室溫下反應30分鐘，檢測反應完全，減壓濃縮除去HCl/THF溶液，殘留物中加入乙酸乙酯溶解，再減壓濃縮除去乙酸乙酯，如此重復數次，直到除盡HCl。在50毫升的圓底燒瓶中加入Boc-Asp(OBzl)-OH(1.615g)，NH2-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2(2.380g)，HOSU(0.575g)，用無水DMF40毫升溶解，在冰水浴下加入DCC(1.030g)后，在室溫下攪拌2小時，檢測反應完全。抽濾除去反應產生的沉淀，減壓濃縮除去DMF，之后用大量乙酸乙酯溶解，依次用NaHCO3、稀鹽酸、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，旋干乙酸乙酯，得到固體3.315g。HPLC純度：大于93％，收率為83％MS＝782(M+1)。

4）Boc-Har-Gly-Ome的合成

在50毫升的圓底燒瓶中加入Boc-Har-OH(1.440g)，NH2-Gly-Ome(0.445g)，HOSU(0.575g)，用無水DMF40毫升溶解，在冰水浴下加入DCC(1.030g)后，在室溫下攪拌2小時，檢測反應完全。抽濾除去反應產生的沉淀，減壓濃縮除去DMF，之后用大量乙酸乙酯溶解，依次用NaHCO3、稀鹽酸、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，旋干乙酸乙酯，得到固體1.687g。HPLC純度：大于95％，收率為94％MS＝359(M+)

5）Mpr(acm)-Har-Gly-Ome的合成

稱取Boc-Har-Gly-Ome(1.795g)置于50毫升的圓底燒瓶中加入6mol/L的HCl/THF溶液20毫升，在室溫下反應30分鐘，檢測反應完全，減壓濃縮除去HCl/THF溶液，殘留物中加入乙酸乙酯溶解，再減壓濃縮除去乙酸乙酯，如此重復數次，直到除盡HCl。在50毫升的圓底燒瓶中加入Mpr(acm)-OH(0.585g)，NH2-Har-Gly-Ome(1.295g)，HOSU(0.575g)，用無水DMF40毫升溶解，在冰水浴下加入DCC(1.030g)后，在室溫下攪拌2小時，檢測反應完全。抽濾除去反應產生的沉淀，減壓濃縮除去DMF，之后用大量乙酸乙酯溶解，依次用NaHC03、稀鹽酸、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，旋干乙酸乙酯，得到固體1.490g。HPLC純度：大于92％，收率為83％MS＝359(M+)

6）Mpr(acm)-Har-Gly-OH的合成

稱取Mpr(acm)-Har-Gly-Ome(1.795g)置于50毫升的圓底燒瓶中加入2mol/L的NaOH/THF溶液20毫升，在室溫下反應30分鐘，檢測反應完全，用稀鹽酸調節pH＝6，出現大量白色沉淀，過濾，用無水乙醚固化，得到白色粉末Mpr(acm)-Har-Gly-OH，質量為1.466g。HPLC純度：大于91，收率為85MS＝345(M+)

7）Mpr(acm)-Har-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2的合成

稱取Boc-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2(3.995g)置于50毫升的圓底燒瓶中加入6mol/L的HCl/THF溶液20毫升，在室溫下反應30分鐘，檢測反應完全，減壓濃縮除去HCl/THF溶液，殘留物中加入乙酸乙酯溶解，再減壓濃縮除去乙酸乙酯，如此重復數次，直到除盡HCl。在50毫升的圓底燒瓶中加入Mpr(acm)-Har-Gly-OH(1.725g)，NH2-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2(3.495g)，HOSU(0.575g)，用無水DMF40毫升溶解，在冰水浴下加入DCC(1.030g)后，在室溫下攪拌12小時，檢測反應完全。抽濾除去反應產生的沉淀，減壓濃縮除去DMF，之后用大量乙酸乙酯溶解，依次用NaHCO3、稀鹽酸、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，旋干乙酸乙酯，得到固體3.902g。HPLC純度：大于87％，收率為76％MS＝1010(M+1)

當Mpr(X)-Har(R4)-Gly-Asp(R2)-Trp(R3)-Pro-Cys(Y)-NH2側鏈保護基，與實施例中一致時，既可以采用步驟a來脫除，也可以采用步驟b來脫除。當側鏈保護基都能用強酸脫除時，則直接采用步驟2脫除。實施例Mpr(acm)-Har-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2合成之后，去側鏈保護基，采用步驟1：

a、稱取Mpr(acm)-Har-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2(5.135g)置于50毫升的圓底燒瓶中加入20毫升甲醇，加入10％Pd/C(0.1g)，通入氫氣致0.03MP，然后在15℃-30℃之間氫化還原24小時，檢測反應完全。濾除10％Pd/C，減壓濃縮除去甲醇，得到油狀物，用無水乙醚固化，得到白色固體產品Mpr(acm)-Har-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys(acm)-NH24.416g。HPLC純度：大于96％，收率為96％MS＝920(M+1)

b、將帶側鏈保護的Mpr(acm)-Har-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2線性肽(4.600g)溶解于二甲硫醚3毫升、苯甲醚3毫升、三氟甲磺酸和三氟乙酸(體積比4∶1)12毫升的混合溶液中，在室溫下反應1小時，加入冰乙醚，得到白色固體3.502g(Mpr(acm)-Har-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys(acm)-NH2)。HPLC純度：大于90％，收率為84％MS＝920(M+1)

當Mpr(X)-Har-G1y-Asp-Trp-Pro-Cys(Y)-NH2中的X和Y都為氫的時候可以采用步驟A或者步驟B；當X和Y為實施例中的基團時，則采用步驟A：

A、將Mpr(Acm)-Har-Gly-Asp-Trp-Pto-Cys(Acm)-NH2(4.595g)線性肽溶于1.5mmol/ml(I2/MeOH)溶液70毫升中，在室溫下反應10～50分鐘，檢測反應完全。得到目標產品質量為3.108g。HPLC純度：大于91％，收率為80％MS＝772(M+)。

B、將Mpr-Har-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2(3.860g)線性肽溶于70毫升水中，將PH調至6～9之間，加入雙氧水2.5毫升，在室溫下反應10-50分鐘，檢測反應完全。得到目標產品酸埃依非巴肽質量為3.282g。

本品又稱依非巴特、埃替巴肽，為血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受體可逆性拮抗劑，不良反應輕，出現可立即停藥。選擇性高作用強。無抗原性，不引起過敏反應。適用于急性冠狀動脈綜合征、冠狀動脈內介入治療前和急性Q波性心肌梗死。可緩解不穩定型心絞痛癥狀，減少心血管事件發生率。可限制非Q波性心肌梗死范圍，減少穿壁型心肌梗死的發生。

用于治療急性冠狀動脈綜合征，起始量180μg/kg靜脈注射，維持量以每分鐘2μg/kg持續靜脈滴注72h，如施行急診經皮冠狀動脈介入術，術后持續靜脈滴注18～24h。用于經皮冠狀動脈介入術，起始量180μg/kg靜脈注射，后每分鐘2μg/kg持續靜脈滴注，10min后再次用180μg/kg靜脈注射，其后以每分鐘2μg/kg持續靜脈滴注18～24h。

針劑20mg/支(10mL)，75mg/瓶(100mL)，200mg/瓶(100mL)。

[1] 國產依替巴肽抗犬血小板聚集作用研究

[2] CN200910156804.X一種依替非巴肽的合成制備工藝

[3] 常用新藥精匯手冊