> CAS號(hào)數(shù)據(jù)庫(kù) > 18598-74-8 > 18598-74-8/L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽的檢測(cè)方法及含量測(cè)定
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L-異亮氨酸甲酯是L-異亮氨酸的保護(hù)形式。L-異亮氨酸被歸類為必需氨基酸，學(xué)名2-氨基-3-甲基戊酸，疏水性氨基酸之一。L-異亮氨酸是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸的一種支鏈氨基酸，有兩個(gè)不對(duì)稱碳原子，是哺乳動(dòng)物的必需氨基酸和生酮氨基酸，并且也是大鼠中膀胱癌的腫瘤啟動(dòng)子。L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽是一種生化試劑，也可以用作醫(yī)藥中間體，是白色細(xì)粉末晶體。
L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽常規(guī)的檢測(cè)方法是銀量法，即在L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽溶液中，加入指示劑鉻酸鉀，用硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，氯化銀先沉淀，當(dāng)磚紅色的鉻酸銀沉淀生成時(shí)，表明Cl離子已被定量沉淀，指示終點(diǎn)已經(jīng)到達(dá)。但是用鉻酸鉀指示劑法，必須在近中性或弱堿性溶液(pH6.5～10.5)中進(jìn)行滴定，若在酸性溶液中進(jìn)行，CrO42-與H+結(jié)合，降低CrO42-濃度，在等當(dāng)點(diǎn)時(shí)不能立即生成鉻酸銀沉淀，此法也不 能在堿性溶液中進(jìn)行，因銀離子氫氧根離子生成氧化銀沉淀；而且此法是依靠指示劑顏色變化來(lái)指示滴定終點(diǎn)，如果待測(cè)溶液有顏色或渾濁時(shí)，終點(diǎn)的指示就比較困難，誤差大。
L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽是一種生化試劑，也可以用作醫(yī)藥中間體。
方法1：一種 L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽含量的檢測(cè)方法，屬于電位滴定法，是在滴定過(guò)程中通過(guò)測(cè)量電位變化以確定滴定終點(diǎn) 的方法，進(jìn)行電位滴定時(shí)，被測(cè)溶液中插入一個(gè)參比電極，一個(gè)指示電極組成工作電池。隨著滴定劑的加入，由于發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，被測(cè)離子濃度不斷變化，指示電極的電位也相應(yīng)地變化。在等當(dāng)點(diǎn)附近發(fā)生電位的突躍。因此測(cè)量工作電池電 動(dòng)勢(shì)的變化，可確定滴定終點(diǎn)。所述方法包括如下步驟：
(1)配制供試品：精密稱取L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽0.5g，加無(wú)水甲酸5mL 溶解后移入100mL容量瓶中，然后加水至刻度線即得供試品；
(2)檢測(cè)：將步驟(1)所配的供試品用硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定，用甘汞 電極作為參比電極，用銀電極作為指示電極；當(dāng)電極電位發(fā)生突躍時(shí)，則滴定到達(dá)終點(diǎn)，記錄硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液用量并計(jì)算得出含量結(jié)果。所述硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為0.01mol/L。與現(xiàn)有技術(shù)相比，優(yōu)點(diǎn)是能準(zhǔn)確判斷滴定終點(diǎn)、誤差小，還能實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化和連續(xù)測(cè)定。
方法2：有研究采用衍生化為輔助手段，建立高效液相色譜法測(cè)定質(zhì)L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽含量的方法。采用島津VP-ODS C18色譜柱(150 mm×4.6 mm，5μm)；以乙酸鈉緩沖液(pH 7.2)-甲醇-乙腈(20∶45∶30)為流動(dòng)相，流速為1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為262 nm；柱溫為40℃。采用9-芴基甲酰氯為衍生化試劑，考察衍生化試劑濃度，反應(yīng)靜置時(shí)間，超聲時(shí)間等衍生化條件，確定衍生化的方法并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果顯示衍生化反應(yīng)條件為：衍生化試劑濃度10 mg/mL，反應(yīng)靜置時(shí)間20 min，超聲10 s。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽在15～75μg/mL范圍內(nèi)線性良好，其平均回收率為92.943%，RSD為4.965%，溶液在5 h內(nèi)穩(wěn)定性。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、快速、耐受性好，符合有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)驗(yàn)證要求，可用于雜質(zhì)L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽的含量測(cè)定。
[1] CN201010184848.6一種L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽含量的檢測(cè)方法
[2] 殷靜， 常艷. 高效液相色譜法測(cè)定 L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽中 L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽[J]. 中國(guó)新藥雜志， 2012， 21(18)： 2137-2140.