287399-26-2 / 丙烯酰胺-13C3的應用

背景及概述^[1]

丙烯酰胺-13C3又叫13C3-丙烯酰胺。可用于丙烯酰胺的測定。

應用^[1]

丙烯酰胺(Acrylamide)，化學分子式CH2CHCONH2，是一種易溶水的無色透明片狀結 晶，作為一種常見的有機合成原料，在工業上得到了廣泛的應用。國際癌癥研究中心(IRAC) 將丙烯酰胺列為IIA類致癌物；WHO認為“致癌風險性超過10-5的指導值為0.5ug/L”；自2002 年瑞典科學家首次發現淀粉類食品在高溫加工過程中會產生大量的丙烯酰胺后即引起全球廣泛關注。

CN201610319641提供了一種綠茶丙烯酰胺測定方法為：

(1)樣品前處理：

稱取粉碎后的綠茶樣品依次加入甲酸、同位素標記丙烯酰胺標準溶液，混勻，在 30-90℃水浴并振蕩10-60min；然后依次加入乙腈、硫酸鎂、氯化鈉，密封振蕩，離心；取上清液，水浴下氮氣吹干，過濾，得到預處理樣品；

所述的同位素標記丙烯酰胺標準溶液為13C3-丙烯酰胺溶解于體積百分比濃度 0.1％甲酸中制得，13C3-丙烯酰胺的濃度為30-70ng/mL。

綠茶粉末、甲酸、同位素標記丙烯酰胺標準溶液的質量體積比為1g∶7-11mL∶0.8- 1.2mL。

綠茶粉末、乙腈、硫酸鎂、氯化鈉的質量體積比為1g∶9-11mL∶3-5g∶0.5-1.5g。

作為優選，通過5000-12000rpm/min離心4-10min，取上清液，在30-90℃水浴下氮氣吹干，經0.45μm微孔濾膜過濾。

(2)凈化：采用固相萃取柱對預處理樣品進行凈化處理，得到待測樣品；

所述的凈化方法為：對固相萃取柱進行預處理后，將步驟(1)得到的預處理樣品進行上樣，收集透過液，過膜，得到待測樣品。

(3)采用高效液相色譜串聯質譜法對待測樣品進行檢測，通過內標法計算丙烯酰胺含量。分別將試樣和系列標準品注入HPLC-MS/MS系統，記錄丙烯酰胺和13C3-丙烯酰胺峰面積，以丙烯酰胺和13C3-丙烯酰胺的濃度比為橫坐標，峰面積比為縱坐標作圖，繪制丙烯酰 胺標準曲線。由此計算樣品中丙烯酰胺的含量。作為優選，每個處理進行三次重復，取其平均值進行分析。

色譜測試條件為：流動相包括體積濃度為為99.9％的水、乙腈的混合液與流動相體積濃度為0.1％的甲酸；流速為200μL/min；進樣體積10μL；柱溫34-36℃，其中水、乙腈的混合液中水與乙腈的體積比為99∶1。

質譜條件：離子化方式為ESI離子源；掃描方式為正電離；檢測方式為多離子反應監測，碰撞能量為8eV，碰撞誘導解離電壓：50V。

離子源條件：干燥氣溫度：325C；干燥氣流速：5L/min；霧化氣壓力：45psi；鞘氣溫度：350℃；鞘氣流速：11L/min；毛細管電壓：3000V，其中：

本發明針對綠茶基質特性，優化樣品前處理方法，以13C3-丙烯酰胺為內標，采用多選擇反應監測(MRM)模式，通過方法學論證，構建基于HPLC-MS/MS的綠茶丙烯酰胺定量分析 方法，同時根據該分析方法在茶區茶樣分析方法上進行了應用，對我國主要產茶區的10個 綠茶樣品進行了丙烯酰胺測定。與現有技術相比，本發明的有益效果是：本發明的檢測方法準確性、重現性、穩定 性較好，適于綠茶中丙烯酰胺的實際檢測。

主要參考資料

[1][中國發明] CN201610319641.2 一種綠茶丙烯酰胺測定方法與應用