31282-04-9 / ?潮霉素B的使用方法

潮霉素B(Hygromycin B)是一種由吸水鏈霉菌（Streptomyces hygroscopicus）產(chǎn)生的抗生素，是氨基糖苷類抗生素之一，為微黃褐色粉末。潮霉素B可通過抑制細菌、真菌和一些高等真核生物細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)生物合成來殺死這些生物。潮霉素B可溶于甲醇、乙醇和水，但在乙醚、氯仿或苯中都幾乎不溶。

作用機理

潮霉素B與大多數(shù)氨基糖苷類抗生素一樣，通過抑制蛋白質(zhì)的合成來阻止微生物生長。它可以穩(wěn)定核糖體大亞基上的tRNA結(jié)合位點，導(dǎo)致空載tRNA不能脫離核糖體，抑制了翻譯的繼續(xù)進行，潮霉素的抑制作用對于原核細胞與真核細胞的核糖體都是有效的。

在研究中的用途

實驗室中使用的瓶裝潮霉素B

在實驗室中，潮霉素B被用于選擇和保持擁有潮霉素抗性基因的原核和真核細胞。潮霉素抗性基因編碼一個激酶（潮霉素激酶），它通過磷酸化潮霉素B使其失活。自從潮霉素的抗性基因被發(fā)現(xiàn)以來，潮霉素B就被用來作為轉(zhuǎn)基因?qū)嶒炛械臉藴屎Y選方法。目前植物組織培養(yǎng)中常用潮霉素B進行篩選。

使用方法

1. 儲存液（100μg/μl） 吉瑪基因提供經(jīng)0.22μm 濾器過濾的潮霉素B 儲存液。 2. 常用篩選濃度 潮霉素B 用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變 化，推薦使用濃度為50-1000μg/ml。對于第一次使用的實驗體系建議通過預(yù)實驗篩選出最小致死濃度。