4168-17-6 / 長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸的作用

背景及概述^[1]

長(zhǎng)春花是夾竹桃科長(zhǎng)春花屬一種重要的藥用植物，原產(chǎn)南亞、非洲東部及美洲熱帶。長(zhǎng)春花全草入藥可止痛、消炎、安眠、通便及利尿，全株具有毒性，誤食后會(huì)造成白血球減少、血小板減少、肌肉無(wú)力、四肢麻痹等癥狀。長(zhǎng)春花全株尤其根部中含有多種吲哚類生物堿，具有很好的藥用價(jià)值。由于長(zhǎng)春質(zhì)堿不穩(wěn)定，容易分解，故一般將其與酒石酸成鹽，形成穩(wěn)定的長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽（也稱為酒石酸長(zhǎng)春質(zhì)堿）。

由于長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽極為難溶，一般的溶劑例如水、苯類、醇類、醚類、氯代甲烷、烷烴等都很難將其溶解，這為長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽的進(jìn)一步純化帶來(lái)了很大的難題。故要想得到高純度的98%以上的長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽，因此需要將長(zhǎng)春質(zhì)堿通過(guò)柱層析、離子交換樹(shù)脂、大孔樹(shù)脂等色譜層析技術(shù)純化成98%以上，然后成鹽，以得到高純度的98%以上的長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽。這種方法純化步驟繁瑣、耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)、長(zhǎng)春質(zhì)堿收率低，不適于工業(yè)化生產(chǎn)。

結(jié)構(gòu)

應(yīng)用^[1-2]

長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽為長(zhǎng)春質(zhì)堿的酒石酸鹽，長(zhǎng)春質(zhì)堿（英文名Catharanthine）是長(zhǎng)春花生物堿中的一種，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明其具有降壓作用，是合成臨床上廣泛應(yīng)用的抗腫瘤藥物酒石酸長(zhǎng)春瑞濱、硫酸長(zhǎng)春堿和長(zhǎng)春新堿的重要起始原料之一，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。

有實(shí)驗(yàn)應(yīng)用熒光光譜法、紫外光譜法和熒光探針研究了酒石酸長(zhǎng)春質(zhì)堿和鯡魚(yú)精DNA分子間的相互作用，在pH為7.4的Tris-HCl緩沖溶液體系中，DNA對(duì)酒石酸長(zhǎng)春質(zhì)堿產(chǎn)生了較強(qiáng)的熒光猝滅作用，其猝滅機(jī)制判斷為靜態(tài)猝滅，計(jì)算了25℃和40℃兩個(gè)不同溫度下酒石酸長(zhǎng)春質(zhì)堿與DNA的結(jié)合常數(shù)分別為5.38×104和5.85×102，結(jié)合位點(diǎn)數(shù)分別為1.405和0.8306。

根據(jù)兩個(gè)溫度下的結(jié)合常數(shù)計(jì)算出酒石酸長(zhǎng)春質(zhì)堿與DNA反應(yīng)的熱力學(xué)參數(shù)ΔHm=-233.77kJ.mol-1，ΔGm(298K)=-27.0kJ.mol-1，ΔSm(298K)=-693.8J.K-1.mol-1，根據(jù)熱力學(xué)參數(shù)確定了酒石酸長(zhǎng)春質(zhì)堿與DNA之間的作用力以氫鍵和范德華力為主.紫外光譜實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著DNA濃度的增大，酒石酸長(zhǎng)春質(zhì)堿的紫外吸收峰發(fā)生顯著降低和藍(lán)移，結(jié)合熒光探針實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明酒石酸長(zhǎng)春質(zhì)堿是以溝槽結(jié)合的方式與DNA結(jié)合。

制備^[1-2]

一種長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽的制備方法，該方法以新鮮的長(zhǎng)春花全株為起始原料，增大了長(zhǎng)春質(zhì)堿的含量，通過(guò)提取、pH萃取分離純化可以得到純度78%左右的長(zhǎng)春質(zhì)堿粗品，再通過(guò)成鹽、重結(jié)晶即可直接得到99%以上高純度的、且易于保存的長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽。具體技術(shù)方案如下：

（1）取新鮮的長(zhǎng)春花全株，用氯化鈉水溶液超聲浸泡，然后取出直接放入流速為5-8m/s的-15～-25℃的冷空氣中冷凍干燥，冷凍干燥后將長(zhǎng)春花全株粉碎；

（2）將步驟（1）的長(zhǎng)春花全株粉末加入水中，調(diào)節(jié)pH為1.3-1.6，超聲浸泡2-3h，過(guò)濾取濾液，將濾液調(diào)整pH為8-9，然后以噴霧的形式從萃取罐頂部噴入，同時(shí)將萃取劑以噴霧的形式從萃取罐的下部噴入，噴入完畢萃取收集有機(jī)相；所述萃取劑為正溴丙烷和乙醇的混合物；

（3）將有機(jī)相減壓除去溶劑，剩余物用無(wú)水乙醇完全溶解，加入硫酸的乙醇溶液調(diào)節(jié)pH至3.8-4.1，靜置、分離，取濾液；

（4）將步驟（3）的濾液減壓蒸干，剩余物用水溶解，調(diào)pH為1.5-2.5，攪拌，至溶液澄清，然后用二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液萃取，取水相，水相調(diào)pH至4.5-4.8，然后用甲苯和石油醚的混合液萃取，將所得有機(jī)相減壓蒸干，得長(zhǎng)春質(zhì)堿粗品；

（5）將長(zhǎng)春質(zhì)堿粗品用甲醇溶解，然后向其中加入酒石酸的甲醇溶液，超聲反應(yīng)，析晶，得長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽；

（6）將長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽加入到N，N-二甲基甲酰胺中，加熱至全溶，然后加入甲醇和乙酸乙酯的混合液，攪拌均勻后重結(jié)晶，所得晶體即為長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽純品。

主要參考資料

[1] CN201410761229.7一種長(zhǎng)春質(zhì)堿酒石酸鹽的制備方法

[2] 酒石酸長(zhǎng)春質(zhì)堿與DNA相互作用的光譜研究