479-91-4 / 蔓荊子黃素的應用

背景及概述^[1][2]

蔓荊子為馬鞭草科牡荊屬單葉蔓荊VitextrifoliaL.var.simplicifoliaCharm.或蔓荊VitextrifoliaL.的干燥成熟果實，主要產于山東、廣西、云南、江西、浙江、福建、及廣東等地。蔓荊子為常用中藥，具有疏散風熱、清利頭目、止痛的功效。臨床上用于治療風熱、感冒頭痛、偏頭痛等癥。據報道，蔓荊子的主要活性成分是黃酮類化合物，其中蔓荊子黃素作為我國2010版藥典規定的蔓荊子藥材的質控指標。

現在研究表明，蔓荊子黃素具有抗缺氧、抗不良刺激、抗疲勞、雙向調節機體、抑制血糖升高和影響學習記憶等多種作用。由此可見，目標成分的開發具有廣泛的商業價值。結構式如下：

目前，蔓荊子中的蔓荊子黃素提取分離主要多采用柱色譜法，分離周期長，消耗溶劑多，操作復雜。高速逆流色譜(High-speedcountercurrentchromatography，HSCCC)作為一種新型分離純化技術，操作方便，快捷，分離度較高，克服了由固相載體帶來的樣品結合、失活、污染等缺點，已被廣泛應用于天然產物活性成分的分離制備和總草藥的分析鑒定。有文獻報道用高速逆流色譜分離純化蔓荊子黃素，但有上樣量少，分離時間長，純化效果不好等缺點，不能實現規模化生產。。

檢測方法^[1]

蔓荊子黃素的常用檢測方法是高效液相色譜，但是在氧化石墨烯修飾的玻碳電極表面可得到一對氧化還原峰，其電催化反應是受吸附控制的電極反應。由于其催化效果明顯，利用循環伏安法即可建立檢測蔓荊子黃素含量的新方法，并用于實際樣品蔓荊子中蔓荊子黃素的含量檢測，結果令人滿意。蔓荊子黃素的電化學檢測新方法與其他分析方法相比，具有靈敏度高、檢出限低、反應快速和操作簡單等特點，為蔓荊子藥物質量的控制和檢測提供了新的平臺。

應用^[3]

蔓荊子黃素具有疏散風熱、清利頭目的功效，主治風熱感冒頭痛、齒齦腫痛、目赤多淚、目暗不明、頭暈目眩等。近年來有關蔓荊子的抗癌活性報道日益增多。蔓荊子黃素是蔓荊子的主要化學成分，王海燕等人報道了其具有抑制人癌細胞增殖的活性并進行了其抗癌機制的研究；SoMinLee等人報道了蔓荊子黃素保護血管的活性。

蔓荊子黃素不僅能通過誘導細胞凋亡發生抗腫瘤作用，還能通過周期抑制、抑制有絲分裂活動機制產生作用。本研究發現，在48h或者72h時間段，即使蔓荊子黃素的作用濃度為5μmol/L，其對細胞的抑制率仍然能達到53.8%和66.6%，對比同時間段，高濃度的蔓荊子黃素（10μmol/L）對細胞的凋亡率分別為16.8%和29.8%，這說明蔓荊子黃素對GH3細胞的增殖抑制作用，不僅是通過誘導細胞凋亡，也可能通過多種機制發揮復合作用。綜上所述，線粒體途徑誘導細胞凋亡是蔓荊子黃素抑制垂體瘤體外細胞生長的機制之一。

制備^[2]

取經干燥的蔓荊子原料粉碎，稱2000g，每次加入10L80％乙醇溶液超聲提取60分鐘，提取3次，減壓濃縮提取液得到浸膏45g。按1質量份浸膏加入100質量份50％乙醇水溶液溶解，石油醚萃取，共萃取3次，合并萃取液回收石油醚得萃取物40g，萃取物上目數為100-200的聚酰胺柱，以體積分數80％的乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥得粗提物，用于高速逆流分離。

在分液漏斗里配制正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水兩相溶劑體系，按體積比1:2:1:2混合，振搖后靜置分層，超聲脫氣30min。取上相注滿高速逆流色譜儀作為固定相，轉動主機，轉速800rpm，同時以5ml/min泵入下相做流動相，水浴溫度為20℃，建立動態平衡后，用流動相溶解粗提物，由進樣閥進樣，紫外檢測器在254nm波長下在線監測，收集各目標成分，連續制備，相應合并回收試劑，濃縮后甲醇結晶，從1000mg粗提物中分離得到高純度的蔓荊子黃素200mg。經HPLC檢測，含量98.0％，經UV、IR、MS、HNMR、CNMR等表征其物理性狀的數據與現有技術相一致。

主要參考資料

[1]王坤, 張桂菊, & 王宏. (2009). 不同地區炒蔓荊子中蔓荊子黃素的含量. 中藥材, 32(9), 1372-1373.

[2] 彭霞, & 臺海川. (2009). Hplc測定傣藥蔓荊葉中蔓荊子黃素的含量. 中國民族醫藥雜志, 15(10), 56-57.

[3] 宋永春, 張曦, 雷光焰, & 黨誠學. (2010). 蔓荊子黃素對p53突變型人乳腺癌細胞增殖和凋亡的影響. 中華醫學雜志, 90(10), 703-707.