480-19-3異鼠李素的藥理作用及應用領域

背景及概述^[1][4]

異鼠李素是一種黃酮類化合物，是一種有力的抗氧化劑，可清除氧自由基從而避免由于年齡老化而引起的細胞和組織損傷。異鼠李素是從銀杏、沙棘等藥用植物中分離提純的黃酮類化合物，也廣泛存在于其他多種植物的花、果實和葉子中，異鼠李素具有保護心血管（抗心肌缺氧、缺血，緩解心絞痛、抗心律失常、降低血清膽固醇、促進血流通暢等）、抗氧化、抗腫瘤、抗炎、抗病毒、抗過敏及調節免疫功能等多種生物活性，特別是在保護心血管方面具有擴張血管降血壓、防治冠狀動脈粥樣硬化心臟病、減輕心肌肥厚、抑制血管平滑肌細胞增生肥大、抗血栓形成等多中作用，具有廣闊的應用前景。

藥理作用^[2][3]

1.抗菌抗病毒作用：異鼠李素具有廣譜抗菌作用，廣泛應用于細菌及真菌感染，包括抑制食物中的葡萄球菌、沙門氏菌、芽孢桿菌、熒光假單胞菌、肉毒桿菌等細菌的繁殖。有研究顯示被注射含有異鼠李素提取物的細菌細胞內蛋白質和碳水化合物都有一定量的減少，最終導致細胞死亡。除此之外，異鼠李素在還具有明顯的抗流感病毒作用，可以直接或者間接抑制病毒的HA和NA基因表達，抑制病毒引發的自噬，ROS的產生和EPK磷酸化。異鼠李素對細菌引起的皮膚感染、泌尿道感染和消化道感染具有一定治療作用。

2.抗氧化作用：異鼠李素是一種天然的抗氧化劑，可以取代人工合成物質作為食品添加劑使用。體內試驗表明，異鼠李素對血漿和肝臟中的膽固醇和過氧化脂質具有抗氧化酶活性。

3.抗腫瘤作用：異鼠李素通過PI3K-Akt-mTOR路徑來抑制結腸腫瘤細胞的增長，對BEL-7402細胞有潛在的抗腫瘤活性，線粒體細胞色素C-caspase-9調節著異鼠李素引起的細胞凋亡。研究表明，異鼠李素能夠通過降低凋亡抑制基因bcl-2表達、增加促凋亡蛋白Bax的數量來發揮誘導凋亡作用。異鼠李素可明顯抑制胃癌SGC7901細胞增殖、降低細胞端粒酶活性、誘導細胞凋亡，且呈濃度和時間依賴性。可能機制為阻滯細胞G₀期向S期的進程，形成G₀阻滯期，造成G₀期細胞堆積阻滯并阻斷細胞DNA合成和復制。異鼠李素對體外培養的皮膚癌細胞的增殖具有抑制作用，可誘導細胞凋亡；體內研究也表明異鼠李素可以抑制皮膚癌細胞的增殖，其機制為異鼠李素在細胞水平減少癌細胞蛋白磷酸化程度，有效地調節蛋白絡氨酸酶（PTK）包括表皮生長因子受體EGFR的活動。

4.心血管保護作用：異鼠李素能夠預防內皮功能障礙，抑制超氧化物的產生和血管緊張素II引起的p47phox過度表達，通過PI3K/AKT活化作用和HO-1誘導作用抑制巨噬細胞凋亡，以此減輕動脈粥樣硬化。

合成方法^[4][5]

合成路徑1:

將2-丁酮與芐基氯混合均勻，加入2,4,6-三羥基苯乙酮和無水K₂CO₃，加水攪拌，將所得的白色混合物和香蘭素溶于無水乙醇，加入KOH水溶液，鹽酸酸化，得3^’-甲氧基-4^’,5,7-三芐基查爾酮，再將該酮溶于乙酸乙酯，在鈀碳催化下，加氫還原，得3^’-甲氧基-4^’,5,7-三羥基查爾酮，將3^’-甲氧基-4^’,5,7-三羥基查爾酮加入二氯甲烷和丙酮混合溶劑，加入緩沖液攪拌均勻，加入KHSO₄復合鹽水溶液，得到異鼠李素。這種四步合成方法工藝操作簡單，生產成本低，所的產品純度高，易于工業化生產。

合成路徑2：

從沙棘果渣中提取異鼠李素，包括（1）冷提：定量稱取沙棘果渣，加入乙醇后常溫浸提，之后將提取液真空抽濾，收集濾液；濾渣加入乙醇，重復常溫浸提2次，之后將提取液真空抽濾，收集濾液，棄濾渣；（2）濃縮：將兩次提取的濾液抽入濃縮罐中，減壓回收溶劑，濃縮得浸膏；（3）去油：將所得的浸膏趁熱用二氯甲烷去油，過濾，得粗晶體；（4）重結晶：將所得粗晶體用有機溶劑溶解結晶，晶體烘干，即得異鼠李素。

應用領域^[6][7]

1.用作抗腫瘤藥物成分

異鼠李素常被用作抗腫瘤藥物，一般用于人舌鱗癌、肝癌、肺腺癌、腦膠質瘤等疾病的治療。以人宮頸癌細胞（Hela細胞）為例，接種細胞以2×10⁵個/ml于250ml培養瓶中，第二天隨機分組加藥，治療組采用含濃度20μg/ml異鼠李素的細胞培養液來處理Hela細胞，陰性對照組為采用不含異鼠李素的培養液處理Hela細胞。人宮頸癌細胞在經異鼠李素處理后，細胞形態改變、增殖變慢、集落形成率低，³H-TdR摻入減少，細胞周期分布改變，基因表達率改變，凋亡率增加和端粒酶活性下降，說明異鼠李素使宮頸癌細胞分化凋亡，并降低人宮頸癌細胞的DNA合成速率和增殖能力，達到治療宮頸癌的目的。下圖為MTT法測定的Hela細胞對照組和治療組的生長情況。

2.用作酪氨酸酶抑制劑

酪氨酸酶使皮膚色素合成中具有多重催化功能的重要酶，兼有加氧酶和氧化酶的雙重功能，是黑色素合成過程中的限速酶，酪氨酸酶的活性與黑色素合成量密切相關，在人體內的活性增高會導致雀斑、黃褐斑等黑色素過渡沉積疾病的發生。在異鼠李素存在的情況下對酪氨酸酶進行活性測定，測得的多巴醌v值在475nm波長處每分鐘吸光值的變化即v值顯著減小，當異鼠李素濃度高于1.5mM時酪氨酸酶剩余活性在10%以下。下圖為異鼠李素對酪氨酸酶的抑制影響圖。

主要參考資料

[1] 趙增光, 劉應才. 異鼠李素的心血管保護作用[D]. , 2008.

[2] Kandakumar Settu, Pharmacological Applications of Isorhamnetin，International Journal of Trend in Scientific Research and Development, Volume 1（4）

[3] 李炯, 王剛, 杜士明, 等. 異鼠李素抗腫瘤的作用及機制研究進展[J]. 山西醫藥雜志: 上半月, 2011, 40(12): 1215-1217.

[4] 郭文華，肖金霞，張瑜，一種異鼠李素的合成方法，CN 201510755625，申請日2015-11-09

[5] 何珺，楊佳年，康冀川，沙棘果渣中異鼠李素的制備及其應用方法，CN 201610527665，申請日2016-07-06

[6] 王正榮，楊春蕾，王躍锜，異鼠李素及其衍生物在治療腫瘤藥物中的應用，CN 03117220，申請日2003-01-23

[7] 錢國英，樸龍斗，斯越秀，異鼠李素作為酪氨酸酶抑制劑的作用，CN 201210039633，申請日2012-02-21