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無花果系桑科無花果屬植物（FicusCaricaL)，無花果的果實中含有多種人體所需的氨基酸，并且含有豐富的VA和VC等多種維生素，不僅口味甘美，而且具有極大的藥用價值。在中醫上，無花果主要用于"健胃清腸，消腫解毒"以及治療腸炎、痢疾、痔瘡等。無花果葉除可以治療痔瘡、腫毒、心痛外，還具有一定的抗高血壓和抗癌作用。無花果葉提取物具有極強的抑菌活性，可作為天然防腐劑用于食品中。補骨脂素和佛手內酯是無花果葉提取物中的主要抑菌成分。補骨脂素還可引起光過敏，注射或內服此等物質，再以長波紫外線或日光照射，可使受照射處之皮膚紅腫、色素增加，甚至表皮增厚；還可用來治療白癜風。
高速逆流色譜技術（High-SpeedCountercurrentChromatography，HSCCC)是近30年發展起來的一種連續的無需任何固體支持物的高效、快速的液液分配色譜分離技術，其原理是利用螺旋柱在行星式的運動時產生的離心力，使互不相溶的兩相不斷混合，同時保留其中的一相（固定相），利用恒流泵連續輸入另一相（流動相），隨流動相進入螺旋柱的溶質在兩相之間反復分配，按分配系數的次序，被依次洗脫。在流動相中分配比例大的先被洗脫，反之，在固定相中分配比例大的后被洗脫。傳統的液相色譜技術進行制備量分離時，分配效率低，溶劑消耗量大，而且固態支持體或載體會帶來樣品被吸附、損耗和變性等問題；而HSCCC能保證較高峰型分辨率，具有操作簡便，分離量大，樣品無損耗，分離效率高，理論回收率為100%，重現性好和分離環境緩和等優點，現已廣泛應用于生物、醫藥、環保等領域化學物質的制備分離和純化。
本發明所要解決的技術問題是提供一種高純度佛手柑內酯和補骨脂素的制備方法。該方法克服傳統分離技術的缺陷，采用高速逆流色譜法（HSCCC)制備高純度的佛手柑內酯和補骨脂素，該方法操作簡便，回收率高，分離量大。
本發明的一種高純度佛手柑內酯和補骨脂素的制備方法，包括：
(1)將A組分、B組分、C組分和D組分按體積比1-5:0.5-1.5:1-5:1-10混合后置于分液漏斗中，搖勻靜置分層，待平衡20-40分鐘后，將上相和下相分開，即得該溶劑體系；其中A組分為乙酸甲酯、乙酸乙酯或乙酸丁酯；B組分為正丙醇或正丁醇；C組分為乙醇或甲醇；D組分為水；
(2)選擇上相為固定相，下相為流動相，先用固定相充滿逆流色譜儀柱子，調節主機轉速為600-1000rpm，將流動相以0.5-5.0ml/min的流速泵入柱內，待整個體系建立動態平衡后，由進樣閥進樣；
(3)根據檢測器紫外圖譜接收目標成分，將流分進行濃縮、結晶，得到佛手柑內酯和補骨脂素。
上述溶劑體系優選為乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水體系。
所述步驟（2)中所進的樣的制備方法為：將無花果提取物溶于上相和下相中。
所述步驟⑴中的溶劑體系為乙酸乙酯-正丙醇-甲醇-水，該四組分的體積比依次為：1:1.5:1:1;所述步驟（2)中的主機轉速850rpm，流動相泵入柱內的流速為5.0ml/min。
所述步驟⑴中的溶劑體系為乙酸甲酯-正丙醇-乙醇-水，該四組分的體積比依次為：4:0.8:2:6;所述步驟（2)中的主機轉速950rpm，流動相泵入柱內的流速為3.0ml/min。
所述步驟⑴中的溶劑體系為乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水，該四組分的體積比依次為：3:0.5:1:8;所述步驟（2)中的主機轉速650rpm，流動相泵入柱內的流速為0·5ml/min。
所述步驟⑴中的溶劑體系為乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水，該四組分的體積比依次為：2:0.5:4:2;所述步驟（2)中的主機轉速600rpm，流動相泵入柱內的流速為0·5ml/min。
所述步驟⑴中的溶劑體系為乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水，該四組分的體積比依次為：3:1:5:9;所述步驟（2)中的主機轉速700rpm，流動相泵入柱內的流速為4.0ml/min。
所述步驟⑴中的溶劑體系為乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水，該四組分的體積比依次為：5:0.7:1:10;所述步驟（2)中的主機轉速800rpm，流動相泵入柱內的流速為2.0ml/min。
所述步驟⑴中的溶劑體系為乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水，該四組分的體積比依次為：5:1.5:3:5;所述步驟（2)中的主機轉速1000rpm，流動相泵入柱內的流速為3.0ml/min。
所述步驟（1)中的溶劑體系為乙酸丁酯-正丙醇-乙醇-水，該四組分的體積比依次為：4:1:1:6;所述步驟（2)中的主機轉速750rpm，流動相泵入柱內的流速為4.0ml/min。
根據溶解度常數，在不破壞體系平衡的情況下，調節A，B，C，D四組分的體積比。
高純度是指純度多98%，經一次分離得到佛手柑內酯和補骨脂素純品，純度在98%以上。
實驗條件適合溫度20-40°C，在上述溫度范圍內，溫度較高時，出峰時間略有提前，分離效果變化不大，對峰形無多大影響。
主機轉速和流速需控制在一定范圍內，按體積比將溶劑體系置于分液漏斗中，搖勻靜置分層。待平衡一定時間后，將上相和下相分開，采用TBE-300B高速逆流色譜儀，該機型柱體積為300ml，進樣圈為20ml，配有TBP-50A泵，TBD-23檢測器和N2000色譜工作站。進樣前，先用固定相充滿整個柱子，調整主機轉速為600-1000rpm，以0.5-5.0ml/min的流速將流動相泵入柱內。
分離和收集到的目標成分，濃縮到一定純度后再進行結晶得到單體。
本發明采用了高速逆流色譜分離技術克服了固態支持物或載體不可逆吸附、損耗和變性，使被分離物回收率高理論達100%，本發明實際達到95%以上，又因為采用優選的溶劑體系，控制實驗條件溫度、調整主機轉速和流速的工藝條件，可以高效率的分離，獲得高純度的佛手柑內酯和補骨脂素（達到98%以上）。
下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。
選取乙酸甲酯-正丙醇-乙醇-水體系在半制備型逆流色譜儀上來分離純化佛手柑內酯和補骨脂素。實驗條件適合溫度為25°C，先按4:0.8:2:6體積比將上述溶劑組分分配置于分液漏斗中，振搖后靜置分層。待平衡一段時間后，將上相和下相分開。采用半制備型逆流色譜儀，配有聚四氟乙烯柱，20ml進樣閥，柱容積為300ml，配有TBP-50A泵，TBD-23檢測器和N2000色譜工作站。稱取300mg無花果粗樣溶解于10ml上相和10ml下相組成的溶液中待用。進樣前，先用固定相充滿整個柱子，調整主機轉速為950rpm，以3.0ml/min的流速將流動相泵入柱內；待整個體系建立動態平衡后，由進樣閥進樣，然后根據檢測器紫外圖譜，接收目標成分，得到佛手柑內酯和補骨脂素流分，濃縮凍干后進行結晶，其HPLC純度達到98.5%。