577-38-8 / 黃諾馬苷的人工抗原制備方法

背景及概述^[1]

兩色金雞菊(Coreopsistinctoria)又名昆侖雪菊，為菊科金雞菊屬的野生草本植物，始載于《新華本草綱要》。其頭狀花序在維吾爾醫醫院常作為一種民族藥材進行使用，具有活血化瘀、和胃健脾、降壓降脂等作用。現代藥理學研究發現，兩色金雞菊的主要活性成分為黃酮類化合物，對其黃酮類化合物的研究現已從最初的提取物研究階段深入到具體的單體成分研究階段。黃諾馬苷全稱為異奧卡寧7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，是從兩色金雞菊乙醇提取物中分離得到的一種二氫黃酮類化合物，被認為是該藥材的有效成分之一，其藥理作用廣泛，但目前關于黃諾馬苷單體的體內外藥代動力學研究并不多見。

人工抗原的制備^[2]

1）采用高碘酸鈉氧化法將黃諾馬苷和牛血清白蛋白（ＢＳＡ）進行偶聯，其原理是將糖基上的鄰二羥基結構氧化為醛基，醛基再與蛋白上的氨基結合得到穩定的以碳－氮單鍵連接的結合物，從而實現了黃諾馬苷與載體蛋白的偶聯。薄層結果顯示偶聯成功，但免疫小鼠后，間接競爭ＥＬＩＳＡ結果顯示小鼠血清對小分子無特異性，分析其原因可能由于高碘酸鈉在氧化糖基上鄰二羥基結構的同時破壞了黃諾馬苷分子中其他鄰二羥基結構，也有可能ＢＳＡ的結構不易暴露氨基等等。

2）采用曼尼希法合成黃諾馬苷人工抗原，將黃諾馬苷與更易暴露氨基的載體蛋白多聚賴氨酸偶聯。經薄層色譜法檢測，偶聯物不隨展開劑展開，而停留在點樣原點，顯現出蛋白特征，但經顯色劑處理后，在點樣處可見明顯色斑，與黃諾馬苷對照品的顏色一致，說明停留在原點的偶聯物同時又具有小分子的特征，由此可見，黃諾馬苷與載體蛋白偶聯成功。

主要參考資料

[1] 黃諾馬苷在MDCK單層細胞模型上的轉運機制分析

[2] 黃諾馬苷人工抗原合成及鑒定