64224-21-1/吡噻硫酮的藥理作用

背景及概述^[1][2]

吡噻硫酮，又叫奧替普拉是法國Rhone-Poulenc廠七十年代中期合成的一種抗血吸蟲新藥，國外商品名Oltipraz。經動物實驗及臨床應用，證明對曼氏血吸蟲、埃及血吸蟲、間插血吸蟲均有顯著的殺滅作用，對日本血吸蟲也有殺滅作用。

制備^[1]

步驟一、吡嗪-2-羧酸甲酯(式3)

將20.0克(805.8毫摩爾)吡嗪-2-羧酸加入到160毫升的甲醇中，攪拌下向其中逐漸滴加1.0毫升的濃硫酸。反應溶液在80至85℃的溫度下回流5小時。將該反應溶液冷卻至20至22℃，并濃縮至25毫升的體積。然后，向得到的濃縮物中，加入80毫升的二氯甲烷和40毫升的水。然后，得到的溶液通過逐漸加入40毫升飽和碳酸氫鈉溶液來中和，得到的PH值為8.5。分離有機層，并且用40毫升二氯甲烷和再次萃取水層。合并的有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾，并且用20毫升二氯甲烷洗滌。濃縮濾出液，得到21.1克標題化合物，為淡棕色固體(收率94.8％)。熔點：60至61℃

步驟二、2-甲基-3-(吡嗪-2-基)-3-氧代丙酸甲酯(式4)

將1.2升四氫呋喃和87.8克(0.78摩爾)叔丁醇鉀加入到反應器中并冷卻至0℃。逐滴加入71.5毫升(0.74摩爾)丙酸甲酯至反應器中，且于0℃ 攪拌30分鐘。將溶解于500毫升的四氫呋喃中的60克(0.434摩爾)步驟一的吡嗪-2-羧酸甲酯在30分鐘滴加至反應器中，并在20至25℃攪拌3 小時。向反應溶液中，加入0.5升蒸餾水和0.5升飽和氯化銨溶液，且攪拌30分鐘。將得到的反應溶液濃縮至1.0升的體積，然后用1.0升的二氯甲烷萃取。得到的萃取液用無水硫酸鎂干燥，并過濾。濃縮濾出液，得到 75.0克標題化合物，為深棕色粘性油(收率89.0％)。¹NMR(δ，CDCl₃)：1.50(d，3H)，3.65(s，3H)，4.70(q，1H)，8.60(d，1H)， 8.80(d，1H)，9.21(s，1H)

步驟三、奧替普拉的合成和重結晶

將300毫升的甲苯、350毫升的二甲苯和48.0克(216毫摩爾)的五硫化二磷加入到反應器中，加熱至120℃至122℃。將40.0克(206毫摩爾)步驟二中制備的2-甲基-3-(吡嗪-2-基)-3-氧代丙酸甲酯溶解于100毫升甲苯，然后滴加入反應器中。使反應溶液在135℃進行回流4小時，然后冷卻至20℃。加入500毫升蒸餾水和500毫升甲醇后，用28％的氨水(約51 毫升)，將得到的反應溶液的pH值調節至8.5。分離有機層，用無水硫酸鎂干燥，過濾，并減壓濃縮。向得到的濃縮物中加入150毫升甲醇，攪拌 1小時，并過濾。濾出液用100毫升甲醇洗滌，得到濕的奧替普拉粗晶體 (12.0至13.0克)。將奧替普拉粗晶體放置在反應器。加入400毫升乙腈，且在80℃溶 解。加入1.4克活性炭并攪拌30分鐘。過濾得到的溶液，用100毫升乙腈 洗滌，在20至25℃攪拌結晶2小時，再在10℃攪拌1小時。過濾得到 的晶體，用20毫升乙腈洗滌，并在40℃真空干燥，得到6.37克奧替普拉 (13.6％收率，＞99.5％純度)。¹NMR(δ，CDCl₃)：2.51(s，3H)，8.70(d，1H)，8.80(d，1H)，9.21(s，1H).

藥理作用^[2]

對感染曼氏血趿蟲的小白鼠，ED₅₀為每天日服50 mg/kg，連服5天，活性高于硝唑咪2倍。猴體給藥ED₅₀為20mg/kg。小白鼠LD₅₀為5g/kg(口服)。鼠與猴體內，無誘變因素和免疫抑制作用。另給劑量45mg/鼠，分3天灌胃，減蟲率為71％，減雌率88％。臨床治療埃及、曼氏和間插血吸蟲病321例，劑量為每天15mg/kg與25mg/kg連服2天，低劑量組治愈率為86％，高劑量組治愈率為94％。若增加劑量、延長療程，則療效更佳。

其他應用^[2]

吡噻硫酮能增加細胞中硫醇含量，誘導對維持谷胱甘肽(GSH)庫和親電分子組織解毒有作用的酶的表達。吡噻硫酮能增加下列酶的活性：NAD(P)H醌還原酶，微粒體環氧化物水解酶，谷胱甘肽轉移酶(GST)和 UDP-GT。尤其是，GST保護肝臟免受某些毒性物質如四氯化碳或對乙酰氨基酚的損害(Ansher SS，Dolan P，和Bueding E.，兩種二硫醇硫酮和丁基羥基茴香醚對四氯化碳或對乙酰氨基酚毒性的化學保護效果，1983肝臟病 學(Hepatology)3，932-935)。并且，吡噻硫酮能抑制苯并[a]芘、NDEA和尿嘧啶氮芥引起的化學致癌作用，以及黃曲霉素B1-誘導的肝腫瘤發生和azoxymethane-誘導的結腸腫瘤發生(Bolton MG，Munoz A，Jacobson LP，Groopman JD，Maxuitenko YY， Roebuck BD，和Kensler TW.吡噻硫酮保護對抗黃曲霉素-誘導的肝腫瘤發生的短暫干涉，1993，癌癥研究(Cancer Res.)53，3499-3504)。已知的通過吡噻硫酮抑制癌發生的機理如下所述。第一，吡噻硫酮能增加組織中抗氧劑、還原的GSH的水平。第二，它通過抑制I相酶如細胞色素P450而抑制致癌物質的生物活化。第三，它通過誘導包括GST和 UDP-GT的II相解毒酶而使致癌物質解毒。第四，吡噻硫酮能抑制體內I 型人免疫缺陷病毒(HIV)的復制。第五，它能夠通過增加硫醇水平和促進 DNA修復而除去反應性中間體。已報道吡噻硫酮能增加大多數組織的GSH 水平，除去由于放射或異生物產生的游離基。還已知通過幫助維持細胞的自動調節，吡噻硫酮能用作對輻射的保護劑。

CN01807369.7報道了吡噻硫酮可以用作有效治療和預防肝纖維化和肝硬化的臨床可行的藥物。當含吡噻硫酮藥物組合物實際應用時，配制成適合于口服給藥的單位劑量形式，按照合適的藥物領域的常規方法給藥。為此，口服劑型包括硬或軟膠囊、片劑、粉末等。除了吡噻硫酮作為藥理活性成分外，該口服劑型可以含有一種或多種藥理非活性的常規載體介質。例如該口服劑型可以含有添加劑淀粉、乳糖、羧甲基纖維素、高嶺土等賦型劑；水、明膠、醇、葡萄糖、阿拉伯膠、黃蓍膠等粘合劑；淀粉、糊精、海藻酸鈉等崩解劑；滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂、液體石蠟等潤滑劑。每日劑量根據多種因素，如患者的肝損傷程度、肝炎的發病時間、年齡、健康程度、并發癥等。但是對于正常的成年人，一天給藥吡噻硫酮一次或兩次，每日總劑量為10-1000mg，更優選50-300mg。但是如果患者患有嚴重的肝損傷或當肝癌切除后用作抗復發藥時，本發明可以偏離上述藥物組合物的范圍，使用更大的劑量。總之，使用吡噻硫酮，一種優異的肝纖維化和肝硬化發展的抑制劑，制備出具有低毒性和幾乎沒有副作用的藥物，該藥物不僅用于治療目的，而且可以通過安全、長期使用達到預防目的。因此，本發明可以安全地長期用于治療和預防肝纖維化和肝硬化。

主要參考資料

[1] CN200380104287.2 制備奧替普拉的方法

[2] CN01807369.7 吡噻硫酮作為肝中抗纖維化藥和抗硬化藥的預防和治療用途以及含有吡噻硫酮的藥物組合物