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672-15-1/L-高絲氨酸的提取方法和應(yīng)用

背景及概述[1]

L-高絲氨酸(2-氨基-4-羥基丁酸)是一種非蛋白氨基酸,其衍生物不僅可以通過酶促反應(yīng)轉(zhuǎn)化為其他重要化工中間體,而且其衍生物具有豐富的生物活性,例如可以有效地抑制鐮狀紅細(xì)胞、抗真菌藥物。L-高絲氨酸還是合成手性除草劑--草銨膦的一種重要中間體,所以在藥學(xué)和生物學(xué)等方面對L-高絲氨酸的研究越來越受到科研工作者的重視。

L-高絲氨酸的提取方法和應(yīng)用

提取方法[1]

一種從發(fā)酵液中提取L-高絲氨酸的方法,包括以下步驟:

步驟1、發(fā)酵液預(yù)處理:取5L上罐發(fā)酵液,高絲氨酸濃度為35g/L,發(fā)酵液調(diào)PH值為4,加入20mg/L水溶性殼聚糖絮凝劑,加熱至60-80℃處理20分鐘,促使水溶性雜蛋白絮凝沉淀,微濾膜除去菌體及絮凝體,獲得發(fā)酵液清液4.8L,利用卷式超濾膜分離系統(tǒng),截留分子量為0.5KDa,操作壓力為2.0MPa,將發(fā)酵液清液中的小分子肽及短鏈蛋白等物質(zhì)去除,收集超濾膜透過液4.7L;

步驟2、脫色:將步驟1收集的超濾膜透過液通入規(guī)格為5英寸活性炭纖維模塊裝置脫色,脫色溫度為30℃,操作壓力0.5MPa,獲得脫色液4.7L,脫色液透光率為78.3%,脫色后用70℃熱水通入活性炭纖維模塊裝置進(jìn)行在線再生循環(huán)使用;

步驟3、電去離子:將步驟2中脫色液送入電去離子裝置的淡室中,在30V電壓下運行,連續(xù)檢測淡室溶液的導(dǎo)電率,當(dāng)導(dǎo)電率降到500μs/cm時停止運行,脫鹽得到脫鹽液,收集脫鹽液4.6L;

步驟4、濃縮過濾:將步驟3得到的脫鹽液減壓濃縮至L-高絲氨酸含量為90%-100%時,濃縮液溫度預(yù)冷至0℃,按每小時1倍體積向濃縮液中緩慢加入有機(jī)溶劑并以50r/min的速度攪拌混勻,待有機(jī)溶劑添加量達(dá)到濃縮液6倍體積時,停止攪拌育晶5小時,繼續(xù)按每小時1倍體積流加有機(jī)溶劑至濃縮液10倍體積,在5℃條件下結(jié)晶16小時,抽濾烘干得到L-高絲氨酸,L-高絲氨酸為122.85g,純度99.3%,收率為70.2%。

所述步驟1中的發(fā)酵液濃度為30-50 g/L,是利用大腸桿菌ZFgs012發(fā)酵產(chǎn)生,該菌株于2020年11月11日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,地址:中國北京,保藏編號為CGMCC NO.21153,分類命名為大腸埃希氏菌 Escherichia coli。

所述步驟1中的水溶性殼聚糖絮凝劑制備步驟包括:

步驟1-1、配制質(zhì)量體積比為1:10的殼聚糖溶液;

步驟1-2、加入冰乙酸調(diào)節(jié)PH值至3.8,充分?jǐn)嚢璨㈧o置12h,其中殼聚糖

的脫乙酰度為95%。

所述步驟3中電去離子裝置中淡室所添加的樹脂為Cl型717樹脂和Na型732樹脂混合,濃室中加入0.02mol/L的氯化鈉溶液,極室中加入0.2mol/L的硫酸鈉溶液,操作電壓為30V,得到的脫鹽液電導(dǎo)率小于500μs/cm。

所述步驟4中的有機(jī)溶劑為乙醇、甲醇和丙酮中的一種。

應(yīng)用[2]

CN201810523387.7報道了一種精草銨膦的制備方法,特別涉及一種以L-高絲氨酸為原料制備精草銨膦的方法。本發(fā)明所述精草銨膦的制備方法,以從生物發(fā)酵法制得的L-高絲氨酸為起始原料,經(jīng)共沸脫水、鹵代等步驟制得L-3,6-雙(2-鹵乙基)-2,5-二酮哌嗪,并通過與甲基亞磷酸二酯進(jìn)行阿布佐夫反應(yīng),再經(jīng)水解反應(yīng)制得精草銨膦。本發(fā)明所述精草銨膦的制備方法,相對于現(xiàn)有制備工藝,大大提高了精草銨膦的總收率,且工藝過程簡單,適于工業(yè)化生產(chǎn)。

參考文獻(xiàn)

[1] [中國發(fā)明] CN202110309816.2 從發(fā)酵液中提取L-高絲氨酸的方法

[2] CN201810523387.7一種精草銨膦的制備方法

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