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71376-34-6 / 串珠鐮刀菌素的毒性

背景及概述[1][2]

由串珠鐮刀菌(Fusarium moniliforme,MON)產生的鐮刀菌毒素。馬屬動物霉玉米中毒的毒原。其臨床癥狀和剖檢病理變化,基本上同于馬屬動物霉豆莢中毒(即新茄病鐮刀菌烯醇中毒)。出現神經系統機能紊亂如失明、嘴唇麻痹、舌外伸、精神沉郁或興奮狂暴、共濟失調等,嚴重者迅速死亡。病理組織學變化為腦組織和軟腦膜充血、出血、大腦皮質細胞變性等。

MON作為污染玉米、小麥和燕麥等糧食作物的霉菌毒素之一,其主要與伏馬菌素等鐮刀菌素形成毒素的聯合污染。MON對動物的毒害作用主要表現在心臟和免疫力上,并且其能夠對細胞產生細胞毒性,其毒性作用機理主要體現在抑制三羧酸循環的正常運轉,導致機體能量供應不足。MON 可由十多種鐮刀菌產生,這些鐮刀菌在自然界分布廣泛,主要引起麥穗、谷粒及玉米等霉變,并能在燕麥、大豆、高粱、大麥、小米、小麥及土壤中生長。

目前已知的鐮刀菌有:串珠鐮刀菌(F.moniliforme),串珠鐮刀菌膠胞變種(F.moniliforme vat"subglutinus),半裸鐮刀菌(F.semitectum),本色鐮刀菌(F.concolor),燕麥鐮刀菌(F.avenaceum),木賊鐮刀菌(F.equiseti),銳頂鐮刀菌(F.acuminatum),禾谷鐮刀菌(F.graminearum),尖孢鐮刀菌(F.oxysporum),鐮形鐮刀菌(F.fusarioides),網脈鐮刀菌(F.reticulatum),黃色鐮刀菌( F.culmorum),桑布鐮刀菌(F.sambucinum),,茄病鐮刀菌(F.solani)等]。

影響毒素產生的因素很多,但決定MON 產生及產量的主要因素有菌株、基質、溫度和時間等。在諸多產毒菌中,串珠鐮刀菌和串珠鐮刀菌膠胞變種產毒量最高,最高達33.7 g/kg。同一菌種,不同的菌株,產毒量也不同。培養基質不同,產毒量有差異,玉米粒基質產毒量最高。MON 產生菌一般在25℃21 d培養為宜,但鐮形鐮刀菌在34。C時產毒量最高,另外培養過程中問斷性低溫可誘導產毒。

結構[2]

與無機酸性質類似,故從結構上也可將串珠鐮刀菌素命名為半方酸鈉(或鉀)。通常為淡黃色針狀結晶,易溶于水和甲醇,不溶于二氯甲烷和三氯甲烷。運用X射線衍射技術確定了串珠鐮刀菌素的空間立體結構由串珠鐮刀菌素鈉的紫外掃描圖可知,串珠鐮刀菌素在227 nm處有最大吸收峰,在256 nm處有次級吸收峰;而紅外光譜表明串珠鐮刀菌素在1 780 cm-1、1 709 cm-1.1 682 cm 、1 605 em~、1 107 cm 和846 cm 處均有吸收。

串珠鐮刀菌素在水溶液中以單體形式存在翻,并在pH值為7時最穩定;另外,在pH值為10時也較穩定。試驗結果顯示,串珠鐮刀菌素在100 oC且pH值為4的溶液中加熱60 min不會遭到破壞,冷凍干燥也不會影響串珠鐮刀菌素的穩定性,但堿法蒸煮能夠部分或者完全將其破壞,破壞程度依賴加工的溫度和時間。

串珠鐮刀菌素的毒性

毒性[2][3]

串珠鐮刀菌素對動物有較強的毒性作用,主要作用于增殖活躍的細胞,例如心肌、肝、脾、骨骼肌以及軟骨細胞和骨細胞等。有學者提出串珠鐮刀菌素的急性毒性作用主要危害心肌,造成充血性心力衰竭、心肌變性和壞死。另外還會使中毒動物身體組織水腫,細胞線粒體異形、空泡變性或顆粒變性,同時還能造成乳頭肌、回腸末端肌肉和主動脈以及肺動脈的收縮力下降。

亞慢性毒性試驗則發現其能影響生長性能,并具有免疫抑制,還可導致豬的大骨軟骨病。此外,通過流行病學等調查顯示,串珠鐮刀菌素可能與人的克山病存在相關性,而且當串珠鐮刀菌素與伏馬菌素(此兩種同為鐮刀菌產生,且產毒菌株種類有交叉)同時存在,由于具有協同作用,其毒性往往比串珠鐮刀菌素單獨引起的毒性強

1.對動物的急性毒性

MON 對實驗動物和家禽有明顯的急性毒性,部分實驗動物和家禽LD 。見表,其敏感性大小為肉仔雞> 雛鴨> 雛雞> 小鼠>大鼠。

串珠鐮刀菌素的毒性

2.動物MON 中毒的癥狀和病理變化

動物MON 中毒的癥狀主要表現為進行性肌無力、呼吸困難、共濟失調、全身紫紺、昏迷直到死亡。動物的特征性損害是心血管系統。大鼠表現為充血性心力衰竭,心肌變性和壞死,心肌線粒體增多、腫脹。肝、腎、胰、腎上腺和胃腸黏膜彌散性細胞壞死。鴨可見腹水,伴有腸系膜水腫,右心房擴大、淤血、心室收縮,心肌積水及心肌蒼白。

小雞發生腹水,腸系膜腫脹、出血,心臟肥大,心肌細胞變性壞死,心肌線粒體增多、腫脹,嵴減少、斷裂或形態各異,心肌膠原纖維減少或溶解,肝臟細胞顆粒變性和空泡變性。小型豬心肌普遍呈現顆粒變性和空泡變性,傳導細胞變性壞死,血管內有微血栓形成。綿羊主要為腎近曲小變性。馬為心肌細胞變性壞死

3.其他毒性

國內研究發現,MON 和人類克山病、大骨節病及食道癌有一定的關系,但存在很大爭議。分別從克山病區分離檢測到MON 或MON 產生菌株。研究證明,MON對北京鴨和雛雞心臟細胞有強烈地毒性,微量元素硒能減輕其損害。對小型豬試驗,表明MON 引起的病變與克山病相似。在大、小鼠也得出同樣的結果。用MON 喂豬,觀察到骨營養不良和骨軟化。

通過對兔關節軟骨細胞的培養,證明了MON 影響軟骨細胞DNA 合成和細胞的分裂增殖,同時也影響細胞結構和代謝功能。MON 可使低硒狀態小型豬發生軟骨病,補硒能減輕病情嚴重程度,同時發現軟骨損害與大骨節病的關節軟骨損害相似。

解毒方法[3]

1.物理化學解毒

采用物理化學方法對糧食和水中的MON 進行了去毒研究,發現H2O2、O2和漂白粉可使MON脫毒,其中O2的脫毒效果最好。研究證明,O。使MON 雙鍵斷裂,四元環打開,產物變成2,3一二羥基一2,3環氧一丁二酸和2一羰基一3一羥基一丁二酸,并證明了MON結構中H 對其毒性起關鍵作用。

2.生物降解

篩選到一株能以MON 為唯一碳源和能源生長的蒼白桿菌屬Y21-2菌株,24 h內使500 ug/mL MON 完全降解,并證明Y21-2菌株細胞內存在能利用MON 的酶系。為今后生物降解MON打下了基礎。

制備[4]

以滅菌玉米粉為培養基。每250g干燥玉米粉加水240mL,拌勻,裝入1000mL三角瓶中,lkg/cm2高壓滅菌45min,冷卻后接種產毒菌株,25℃培養十天,轉4℃培養7天,再轉25℃培養10天。每1kg培養物加2.5倍量的蒸餾水浸泡24小時,重復一次,水提取液減壓濃縮后按體積加入4L無離子水洗脫去雜質,再用氯化鈉溶液洗脫,沒50毫升收集一瓶,薄層層析法檢測,合并含毒素部分,濃縮至干,用無水甲醇溶解,除去不溶的NaCI,濃縮毒素,粗毒素經水一甲醇反復處理,最后得到淺棕色結晶。

主要參考資料

[1] 獸醫大辭典

[2] 趙獻軍. 串珠鐮刀菌素研究進展[J]. 動物醫學進展, 2002, 23(4): 19-22.

[3] 高思, 雷明彥, 齊德生, 等. 串珠鐮刀菌素的理化性質, 毒作用機理及中毒動物概況[J]. 飼料工業, 2012 (8): 53-57.

[4] 趙獻軍, 汪昭賢, 曹光榮, 等. 串珠鐮刀菌素的提取與鑒定[D]. , 1998.

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