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9001-77-8 / 血清「酸性磷酸酶」測定

酸性磷酸酶 (acid phosphatase, ACP) 是一組在酸性條件下水解磷酸單醋類化合物的酶。 ACP 存在于人體多種組織或細胞,主要有紅細胞、血小板、脾臟、骨髓以及男性的前列腺等。男性血清中 ACP大約一半來自前列腺,男性血清的其他 ACP 和女性血清 ACP主要來自骨骼破骨細胞、紅細胞等。

ACP有多種,來自前列腺的ACP稱前列腺ACP (p-ACP) , 可被右旋酒石酸抑制,其他不被酒石酸抑制,稱酒石酸抵抗 ACP(tr-ACP)。 p-ACP 升高主要與前列腺腫瘤有關, tr-ACP 升高主要與骨溶解和再造有關。 ACP 測定主要采用活性測定,有多種方法。一種比色法以磷酸麝香草酚酞為底物,此底物對 p-ACP 有一定特異性,曾有較廣泛應用。另一種方法是速率法,通過 一系列反應,連續監測有色物質的生成,易于自動 化,是目前常用方法。近年出現利用免疫分離的活性 測定方法,可特異性測定特定種類的 ACP。本節介紹目前應用較多的速率法。

原理

血清 ACP 在酸性條件下水解 α-萘酚磷酸酯,生成α-萘酚和磷酸, α-萘酚與固紅TR 反應生成有色物質,在 405nm 波長處有吸收。在底物過剩的情況下,α-萘酚的生成速率與血清 ACP 放度成正比,有色物質生成速率與α-萘酚的生成速率成正比,因而可通過監測有色物質升高測定血清 ACP 活性濃度。 ACP 活性測定的酶促反應式如下:

血清「酸性磷酸酶」測定

反應體系中加入 1,5-戊二醇等醇類物質作為磷酸接受體,以加速磷酸酯水解。可通過加和不加酒石酸,分別測定 tr-ACP 和總 ACP (t-ACP) 。

試劑

主要試劑成分包括α-萘酚磷酯、固紅 TR 或相似物質、 1,5-戊二醇、枸櫞酸緩沖液等, 測定 tr-ACP 時含酒石酸,測定 t-ACP 時不含酒石酸。 各商品試劑成分相似,各成分濃度及樣品體積分數存在一定差異,詳見各試劑說明書。

操作

測定過程一般為,試劑與樣品棍合后溫育一段時間(如 5 分鐘) ,隨后監測一定時間 (1 -3 分鐘)內吸收度( 405nm 左右)變化。反應溫度 37℃。不同實驗室具體測定條件會因所使用的儀器和試劑而異,在保證方法可靠的前提下,應按儀器和試劑說明書設定測定條件,進行定標品、空白樣品和血清樣品分析。

結果計算

血清樣品 ACP催化活性濃度可按有色物質消光系數計算或用定標品校準。

參考區間

不同方法參考區間不甚一致,一般成人血清 t-ACP參考上限 7U/L 左右, tr- ACP 5U/L 左右。

注意事項

血清 ACP 不穩定,血清分離后需盡快加入適量乙酸,降低血清 pH 至 5.4 ,以穩定 ACP。紅細胞中含大量 ACP,需盡快分離血清,溶血樣品不可用做 ACP 測定。

臨床意義

血清 tr-ACP 主要是一個溶骨活動指標, Paget 病、甲狀旁腺功能亢進、骨腫瘤或腫瘤骨轉移、骨石化癥等情況時血清 tr-ACP 可升高。與骨無關的一種血清 tr-ACP 升高的情況是 Gaucher 病, 毛細胞白血病的毛細胞表達 tr-ACP,毛細胞白血病時 tr-ACP 是組織化學指標,但血清 tr-ACP 一般不升高。前列腺癌,特別是有轉移時,血清 ACP 或 p-ACP 明顯升高。血清 ACP 或 p-ACP 曾廣泛用于前列腺癌診斷或監測,但目前已基本被前列腺特異性抗原 (PSA) 取代。

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