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眾所周知，單克隆抗體和多克隆抗體可以用于包括蛋白質(zhì)印跡，酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA），免疫沉淀（IP），免疫熒光，免疫細胞化學(xué)，生物芯片技術(shù)和疾病診斷在內(nèi)的多種應(yīng)用。它們各有各自的優(yōu)點使其在不同應(yīng)用中扮演著不一樣的角色。為了更好地確定在特定應(yīng)用中那種抗體最優(yōu)，首先讓我們先來了解下兩者。
1、如何區(qū)分單克隆抗體和多克隆抗體
存在于抗原表面的，決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團稱為抗原決定簇，又稱抗原表位。一個抗原可以有一種或多種不同的抗原表位，每種表位只有一種抗原特異性。
用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物，可刺激機體多個 B 細胞克隆產(chǎn)生針對多種抗原表位的抗體，就是多克隆抗體（polyclonal antibody, pAb）。由單一 B 細胞克隆產(chǎn)生的識別一種抗原表位的抗體，稱為單克隆抗體（monoclonal antibodies, mAb）。
2、單克隆抗體和多克隆抗體的關(guān)鍵區(qū)別
| 屬性 | 單克隆抗體 | 多克隆抗體 |
| 抗體群體 | 同質(zhì)性 | 異質(zhì)性 |
| 結(jié)合特異性 | 識別目標(biāo)抗原上的單一表位 | 識別目標(biāo)抗原上的多個表位 |
| 靈敏度 | 蛋白質(zhì)定量方面靈敏度高 | 對低數(shù)量的蛋白質(zhì)有較高的靈敏度 |
| 交叉反應(yīng) | 特異性高，交叉反應(yīng)低 | 存在生物物理多樣性，交叉反應(yīng)高 |
| 生產(chǎn)成本 | 昂貴 | 低廉 |
| 來源 | 受刺激的B細胞的單系：雜交瘤 | 受刺激的B細胞的多個系別 |
單克隆抗體和多克隆抗體的優(yōu)缺點
單克隆抗體的優(yōu)點
1、不朽的供應(yīng)
一旦創(chuàng)建了單克隆抗體雜交瘤，就可以產(chǎn)生無限量的高度特異性抗體。
2、高度特異
mAb在測定中用作一級抗體或用于檢測組織中的抗原是非常理想的選擇。
3、重現(xiàn)性高
單克隆抗體產(chǎn)生較低背景染色和批次變化，并且具有低交叉反應(yīng)性。因此，它們提供可重復(fù)的結(jié)果并確保親和純化的效率。
單克隆抗體的缺點
1、特異性過高，以致于無法進行跨物種的檢測。
2、與多克隆抗體相比，更易受化學(xué)處理造成的抗原表位丟失的影響。
多克隆抗體的優(yōu)點
1、高親和力
由于抗體的結(jié)合點多于一個表位，多克隆抗體可以幫助擴增具有低表達水平的靶蛋白的信號。這使得這些抗體成為免疫沉淀和染色質(zhì)免疫沉淀的理想選擇。
2、容忍輕微的變化
多克隆相對單克隆抗體來說，對于抗原變化（輕度變性，多態(tài)性，糖基化的異質(zhì)性）較不敏感。
3、更強的檢測信號
多個表位通常提供更強大的信號，更加容易檢測。
多克隆抗體的缺點：
1、易產(chǎn)生批次間差異。
2、產(chǎn)生大量非特異性抗體，可能會在某些應(yīng)用中產(chǎn)生背景信號。
3、由于具有多個表位，檢測免疫原序列的交叉反應(yīng)性非常重要。
4、不適用于探測抗原的特定結(jié)構(gòu)域，因為抗血清通常會識別多個結(jié)構(gòu)域。