1. 將偶聯(lián)好抗原或抗體的填料或瓊脂糖凝膠放入5-10 ml純化柱中，棄去保存液。
2. 純化柱中加入10 ml預洗脫液洗脫一次，棄去流穿液。
3. 純化柱中加入10 ml洗脫液，得到的流穿液即為抗體。棄去前3 ml流穿液，后面7 ml分成7管，每管接1 ml流穿液，抗體收集管中預先加入50 ul收集液。
4. ELISA檢測7管抗體的效價，保留效價最高的2-3 ml抗體。
5. 效價較低的抗體可以進行濃縮。將保留的抗體加入超濾管中，4℃離心，水平離心機轉(zhuǎn)速4000 g，如果是角轉(zhuǎn)離心機轉(zhuǎn)速5000 g，離心15-60 min。時間需根據(jù)超濾管中甩下的液體來控制，濾膜以上和以下液體的體積比可估算濃縮的倍數(shù)。
6. 濾膜以上液體即為抗體，為了更多的收集抗體，離心后直接將超濾管垂直放入超聲清洗器中，超聲20 min。如果沒有超聲清洗器，可以用移液器吹打濾膜以上液體。
7. 抗體長期保存可加入40%甘油和0.05%疊氮鈉，-20℃~-80℃保存。