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產(chǎn)品詳情

大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞
基本信息
產(chǎn)品名稱 : 大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞
產(chǎn)品品牌 : 紀寧生物
組織來源 : 胎盤組織
產(chǎn)品規(guī)格 : 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介  

大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞細胞分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由 胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當?shù)莫毩⑿浴LケP還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。胎盤間充質(zhì)干細胞(m esenchym alste m cell,MSC)是一種多能干細胞,是具有自我復(fù)制能力的多潛能細胞。

在一定條件下,它可以分化成多種功能細胞像A PSC 多能細胞。在胚胎發(fā)育中來源于中胚層。在機體正常的組織損傷修復(fù)過程中,M SC是一種重要的參與組織再生的細胞庫。在組織損傷引起的特殊信號作用下,M SC遷移到受損部位,在局部聚集增殖,依據(jù)不同的損傷信號沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴增,體外倍增能力旺盛,能保持其多向分化能力。因此,M SC 是一種實用的組織修復(fù)種子細胞。相較于其他干細胞,胎盤間充質(zhì)干細胞具有來源方便,細胞數(shù)量充足,易于分離、培養(yǎng)、擴增和純化,傳代擴增多代后仍具有干細胞特性。胎盤是干細胞的最佳來源。


方法簡介

紀寧生物實驗室分離的大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞采用胰蛋白酶-膠原紀寧合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。


質(zhì)量檢測

紀寧生物實驗室分離的大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞經(jīng)C D 90免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁 
細胞形態(tài) : 成纖維細胞樣 
傳代特性 : 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 :  1:2
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用紀寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片


使用方法

大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,在紀寧生物技術(shù)部標準操作流程下,細胞可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳;建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1.取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4)待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


大鼠胎盤間充質(zhì)干細胞

注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和紀寧生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們紀寧系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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