elisa试剂盒_91精品在线免费视频_生化试剂盒_91精品在线免费观看视频_原代细胞_91精品在线播放_细胞系_上海研域商贸有限公司



手機掃碼訪問本站


微信咨詢

腮腺炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

品牌:紀寧生物

貨號:JN28511

規格: 50次

聯系方式:021-54721350

立即詢價 說明書下載

產品詳情

腮腺炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
產品及特點
腮腺炎病毒(Mumps Virus,MV)是一種RNA病毒,人是腮腺炎病毒惟一宿主,病毒經飛沫傳播,易感者為學齡期兒童,好發于冬春季節。本病潛伏期約2~3周,病毒侵入呼吸道上皮細胞和局部淋巴結內增殖后,進入血流,然后經血流侵入腮腺及其它腺體器官如睪丸、卵巢、胰腺、腎臟和中樞神經系統等。臨床表現主要為一側或雙側腮腺腫大,伴發熱、乏力、肌肉疼痛等,并發睪丸炎者可導致男性不育癥,腮腺炎也是導致兒童期獲得性耳聾的常見原因,因此腮腺炎病毒的快速準確鑒定對該病的預防和檢疫有著重要作用。本產品基于PCR原理開發。
1. 一站式,用于不需要單獨準備每種成分,包括引物和對照。
2. 根據腮腺炎病毒的保守基因序列設計的引物,具有良好的特異性。
3. 基于染料法 qRT-PCR 檢測,靈敏度比常規 RT-PCR 高 10-100 倍,可以達到至少 1000 拷貝/反應。
4. 使用一管式 qRT-PCR 技術,RT 和 PCR 兩步在一個試管內完成,不需要中間轉移樣品,降低了操作誤差和可能的污染。
5. 本產品足夠 50 次 30μL 體系的 RT-PCR。
規格及成分

編號

成分

規格

試劑一

2×qRT-PCR 緩沖液

500 μL(棕色管)

試劑二

10×qRT-PCR 酶混合液

100 μL(紅蓋)

試劑三

ROX 染料 I,50×

20 μL(棕色管)

試劑四

ROX 染料 II,50×

20 μL(棕色管)

試劑五

熒光 PCR 專用模板稀釋液

1mL(黃蓋)

試劑六

腮腺炎病毒染料法 qRT-PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑七

腮腺炎病毒染料法 qRT-PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/μL)

50 μL(黃蓋)

試劑八

沙核酸釋放劑(試用裝)

20 次(1mL,綠蓋)

試劑九

使用手冊

1 份

運輸及保存
低溫運輸、-20℃保存,有效期一年。
陽性對照需要因易污染其他成分需要單獨放置。本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供 DNA 片段作為陽性對照。
自備試劑
樣品 RNA。
使用方法
一、稀釋陽性對照:
以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例,由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液,最好用帶芯槍頭,下同)。
2. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(本試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
3. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備:
5. 如果有 N 個樣品,必須設置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用 10μL 上步制備的陽性對照梯度稀釋液中的第 4 號(濃度為 1×10E4 拷貝/μL,10μL 相當于 1 萬拷貝)再加上一定量的水作為制備的陽性對照(加水后其總體積跟樣品一樣,樣品體積多少取決于所用試劑盒的要求)。可以用水作為制備的陰性對照。
6. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 RNA 提取試劑盒兼容。
三、設置 RT-PCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行):
7. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照,6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于 PCR 陽性對照(用第 4 號陽性對照稀釋液做模板)。下面只描述定量分析的步驟,定性分析只是把 6 個標曲反應縮減成 1 個,其余不變。
8. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子后最后加):

成分

N+2個制備所得樣品

qRT-PCR

陰性對照

qRT-PCR 陽性對照

(2-7 管)

2×qRT-PCR 緩沖液

10μL

10 μL

10 μL

腮腺炎病毒染料法qRT-PCR 引物混合物

2 μL

2 μL

2 μL

50×ROX (見注)

0.4μL

0.4μL

0.4μL

樣品制備所得 RNA 模板

(來于第 8 步)

5.6μL

--

--

稀釋所得 6 個陽性對照

(來于第 6 步)

--

--

5.6μL(2 號樣到 2 號 管,3 號樣到 3 號管…)

超純水

--

5.6μL

--

10×qRT-PCR 酶混合液

2μL

2μL

2μL

注: 需使用 ROX 染料 I 的機型:ABI Prism7000、7300、7700、7900HT、Step-One、Step-One Plus。
需使用 ROX 染料 II 的機型:ABI Prism 7500、7500Fast、MJ Research的 Chromo4、Opticon(II)Corbett Rotor Gene 3000。
不需要使用ROX 的機型:Thermal Cycle Dice Real Time System,LightCycler、Smart Cycler System、Agilent Mx3000P、RotorGene3000、RotorGene 6000。
9. 上機后按下面參數進行 RT-PCR(參數可能會因儀器不同而需優化)。

過程

溫度

時間

RT(逆轉錄)

50℃

15-30 min

預變性

95℃

5 min

Qrt-PCR反應 40 個循環

95℃

15 sec

58℃

1 min,(采集FAM通道的熒光信號)

按儀器預設程序進行溶解曲線分析

四、數據處理:
10. 如果把本試劑盒用于定量檢測,則以陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品的 Ct 值從標準曲線上推算出樣品 DNA濃度的 log 值,再推算出其濃度。
11. 如果把本試劑盒用于定性檢測,只判斷陽性或陰性,則陰性對照 Ct 必須大于或等于 40。陽性對照必須有熒光對數增長,有典型擴增曲線,Ct 值應該小于或等于 30。對待測樣品,如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性,如果小于或等于 35 則為陽性。如果在 35-40 之間,則重復一次。重復實驗的 Ct 值如果大于或等于 40 則為陰性,如果小于 40,則為陽性。
友情鏈接:
elisa試劑盒 elisa檢測試劑盒 上海晶抗生物 elisakit 植物elisa試劑盒 CAS號數據庫
Copyright ? 2006-2023 上海研域商貿有限公司. All rights reserved. 版權所有 滬ICP備13030217號-3 網站地圖
主站蜘蛛池模板: 双单面研磨机_陶瓷平面研磨机_机械密封件研磨机-百诚研磨机械 | 扫路车_洗扫车_清扫车_道路清扫车_天锦洗扫车-程力专用汽车股份有限公司 | 涡流探伤仪-超声波探伤仪-上海仓信电子科技有限公司 | 泡沫混凝土垫层填充厂家,发泡混凝土垫层填充,轻质混凝土垫层填充厂家,深圳市鸿奥建材发展有限公司 | 西安外墙防水补漏-堵漏-防腐-保温工程公司-陕西宏图祥瑞实业有限公司 | 惠声电子、广州市惠声电子科技有限公司、VBS、VBS惠声电子、VBS公共广播生产厂家、VBS广播功放生产厂家、VBS会议系统设备批发、VBSIP网络对讲系统厂家、VBS会议系统厂家、VBS智能中控厂家、VBS专业扩声厂家 | 墨子百科-专业有趣的问题小百科 莫非传媒官网-江西知名的网络营销推广服务平台南昌网络公司,专业网络公关,品牌危机处理,网站SEO优化,微信朋友圈广告,网站建设,南昌莫非文化传媒有限公司 | 托辊|滚筒|聚氨酯托辊|缓冲托辊|尼龙托琨|衡水良龙输送机械有限公司 | 久久黄色一级视频_视频一区精品自拍_理论片免费ā片在线观看_亚洲色视频在线播放网站_香港经典a毛片免费观看_亚州三级久久电影 | 银马全自动免烧砖机设备厂家,提供免烧砖机价格报价及生产视频 | 郑州建网站,郑州做网站,郑州网站建设,郑州网站制作,郑州高端定制网站,郑州APP开发 | 宜宾三江人才网_三江人才网_宜宾三江人才网_三江人才直聘网是本地颇具规模的网上人才市场 | 西安西雷脉冲功率技术有限公司-高压调制器/加速器与脉冲功率系统的研发/生产/应用推广/高压脉冲电源的应用研究/设计/生产和销售/高功率脉冲器件/材料与仪器设备的研发/生产和销售/高电压/大电流/强磁场环境的模拟及测试服务/会议会展服务/货物及进出口的业务/脉冲功率技术领域类的技术转让 | 树脂排水沟,树脂混凝土排水沟生产厂家-吉林省科维水泥制品公司 | 真空上料机_加料机_天津自动上料机_投料站_包装机加料_吸料机_粉体称重-天津市飞云粉体设备有限公司 | 浙江微龙科技-微通道工艺结合设备一站式解决方案-致力于连续流技术开发与产业化应用-助力传统医药化工行业转型升级 | 内蒙古碧云食品有限公司 | 银泰洁净--净化工程总承包,20年精耕细作,专为净化而来_银泰洁净--净化工程总承包,20年精耕细作,专为净化而来 | 上海海外置业展_2024海外置业移民留学展_4月5-7日_企业参展处/免费领门票 | 长沙变频器维修,变频器维修,ABB变频器维修,西门子变频器维修,施耐德变频器维修,伺服驱动器维修,工业机器人维修,20年专业工控电气维修,长沙文铖电气设备有限公司_长沙文铖电气设备有限公司 | 碳减排领域专业技能人才培养工程综合服务平台 | 武汉凯美隆窗帘厂家_定做商用窗帘_家用遮阳帘_涵盖电动窗帘_天棚帘_遮阳棚_凯美隆-专注遮阳产品 武汉净化机-武汉全热新风换气机-武汉静音送风机-武汉东信新风节能设备有限公司 | 树脂排水沟,树脂混凝土排水沟生产厂家-吉林省科维水泥制品公司 | 喜来顺财经-专注于财经领域的综合性网站 | 语音芯片_蓝牙芯片_ble数传芯片_蓝牙数传模块厂家_拓达半导体-蓝牙数传芯片模块原厂 | 上海鳞片胶泥-环氧胶泥价格-鳞片涂料批发-乙烯基树脂-环氧结构胶-上海富晨 | 水阻柜-液阻柜-高压开关柜-高压固态软启动柜-磁控软启动柜-电解粉-无功补偿柜-配电柜-襄阳源创电气 | 金酱酒_金酱酒代理加盟招商_OEM贴牌企业定制! – 金酱酒代理加盟!茅台镇较早的酿酒烧坊,年产优质酱香白酒5000余吨,仁怀市十强白酒企业,主营主品:金酱酒、金酱陈香酒、酱香老酒等系列品牌产品 | 上海搬运公司_上海工厂设备搬迁_大型设备吊装搬运_设备安装公司-桂星装卸搬运 | 升降作业平台_自行-车载-液压升降机_登车桥-强峰升降台 | 磐林投资-大宗林产品现货电子交易|林业碳汇|林权交易|农林产品投资 | 景观造雾_人造雾设备_雾森系统_冷雾降温_雾化消毒_喷雾除尘厂家-成都景程雾森 | 河南新百福国际物流有限公司 | 宣传片拍摄-宣传片制作-三维动画-企业视频广告报价-北京环宇影音 | 消防车厂家_东风水罐泡沫消防车价格图片吨位-湖北新东日专用汽车有限公司 | 培训桌-培训椅-会议椅-洽谈桌-培训桌椅生产厂家-【鼎优家具】 | 康复器材_常州市友邦医疗康复器材有限公司官网 | 济宁山银煤矿机械有限公司,钻采工具,防爆电器,凿岩机械,风动工具,矿山机械,建筑机械,支护设备,通风防尘,铁路设备,仪器仪表,大型设备,矿用泵,钎具类,消防类,矿车类,配件区类 | 仪商网-专业测试仪器,测量仪表行业信息综合门户 | 视频制作_产品宣传片拍摄_二维动画制作公司-深圳火牛传媒 | 欣宇航化工-湖北片碱-冰醋酸厂家联系方式-工业氨水价格-工业片碱厂家-武汉宇航化工 |