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丙酮酸(PA)/含量檢測試劑盒/50T

品牌:紀寧生物

貨號:JN37923

規格: 50T/48S

聯系方式:021-54721350

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產品詳情

英文名稱 :Pyruvate(PA) Content Assay Kit
產品包裝 :盒裝
產品規格 :50T/48S
儲存條件 :2-8℃
檢測方法 :可見分光光度法
有 效 期  :6個月

產品組成:

試劑名稱

規格

保存條件

提取液

液體60 mL×1瓶

2-8℃保存

劑一

液體7 mL×1瓶

2-8℃保存

液體30 mL×1瓶

2-8℃保存

標準品

液體1 mL×1

2-8℃保存


產品說明:
丙酮酸通過乙酰 CoA 連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。丙酮酸與 2,4-二硝基苯肼作用, 生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液中呈櫻紅色。



技術指標:
最低檢出限:0.001μmol/mL
線性范圍:0.0015-0.25μmol/mL

注意:
實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。

注意事項:
1. 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。
2. 提取液中含有蛋白變性成分, 若使用蛋白濃度計算需要另取樣本提取測定。

實驗實例:
1. 稱取約0.1171g兔肝,加入1mL提取液,進行冰浴勻漿,靜置30min ,8000g,常溫離心10min,取上清待測。 之后按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A測定管-A空白管=0.570-0.101=0.469 ,ΔA標準 =A標準管-A空白管=0.541-0.101 =0.440,計算丙酮酸含量得:
PA(μmol/g 質量)=0.125×ΔA測定÷ΔA標準÷W =1.138μmol/g  質量

2. 稱取約0.1094g合歡,加入1mL提取液,進行冰浴勻漿,靜置30min ,8000g,常溫離心10min,取上清用蒸餾水稀釋2倍后待測。之后按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A測定管-A空白管=0.886- 0.101=0.785 ,ΔA標準=A標準管-A空白管=0.541-0.101 =0.440,計算丙酮酸含量得:
PA(μmol/g質量)=0.125×ΔA測定÷ΔA標準÷W×稀釋倍數=4.077μmol/g質量

3. 取50μL兔血清之后按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA=A測定管-A空白管=0.146-0.101=0.045, ΔA標準=A標準管-A空白管=0.541-0.101 =0.440,計算丙酮酸含量得:
PA(μmol/mL)=0.1375×ΔA測定÷ΔA標準=0.014μmol/mL
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