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產(chǎn)品詳情

英文名稱 :Glutamate(Glu)Content Assay Kit(WST colorimetry)
儲(chǔ)存條件 :-20℃
產(chǎn)品包裝 :盒裝
檢測方法 :可見分光光度法
有 效 期  :6個(gè)月
產(chǎn)品規(guī)格 :50T/24S

產(chǎn)品組成:

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

試劑一

液體70mL×1瓶

2-8℃保存

試劑二

液體2.5mL×1瓶

2-8℃保存

試劑三

粉劑×2瓶

-20℃保存

試劑四

粉劑×2支

-20℃保存

試劑五

液體12mL×1瓶

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)液

液體0.5mL×1支

2-8℃保存


產(chǎn)品說明:
Glu廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一,而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外,Glu還是味精的主要有效成分,常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。

谷氨酸脫氫酶(GDH)催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH??在1-mPMS作用下,WST-1可與NADH反應(yīng),產(chǎn)生水溶性formazan,計(jì)算谷氨酸含量。



技術(shù)指標(biāo):
最低檢出限:0.009μmol/mL
線性范圍:0.019-0.3125μmol/mL

注意:
實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/超聲破碎儀、冰、蒸餾水。

注意事項(xiàng):
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
1、稱取約0.1g鼠肺,加入1mL試劑一,冰浴研磨,10000g,常溫離心10min取上清,待測。之后按照測定步驟操作,用比色皿測得計(jì)算ΔA測定=A測定-A對(duì)照=0.475-0.345=0.13,標(biāo)準(zhǔn)曲線y=1.7612x+0.0039,根據(jù)標(biāo)曲得出x=0.072,谷氨酸含量得:谷氨酸含量(μmol/g質(zhì)量)=x×V樣本÷(W÷V樣總×V樣本)=x÷W=0.72μmol/g。

2、吸取0.2mL羊血清,按照測定步驟操作,用比色皿測得計(jì)算ΔA測定=A測定-A對(duì)照=0.669-0.141=0.528,
標(biāo)準(zhǔn)曲線y=1.7612x+0.0039,根據(jù)標(biāo)曲得出x=0.298,谷氨酸含量得:
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