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人T淋巴細(xì)胞

品牌:紀(jì)寧生物

貨號:JN-CC6075

規(guī)格: 5x10?cells/T25或1mL凍存管

聯(lián)系方式:021-54721350

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產(chǎn)品詳情


一、細(xì)胞基本信息

細(xì)胞名稱

T淋巴細(xì)胞

細(xì)胞品牌

紀(jì)寧生物

細(xì)胞規(guī)格

5x10?cells/T25或1mL凍存管

種屬來源

組織來源

外周血

生長特性

懸浮生長

細(xì)胞簡介

T淋巴細(xì)胞來源于骨髓的多能干細(xì)胞,骨髓中的一部分多能干細(xì)胞或前T細(xì)胞遷移到胸腺內(nèi),在胸腺激素的誘導(dǎo)下分化成熟,成為具有免疫活性的T細(xì)胞。T細(xì)胞是相當(dāng)復(fù)雜的不均一體、又不斷在體內(nèi)更新、在同一時間可以存在不同發(fā)育階段或功能的亞群,按免疫應(yīng)答中的功能不同,可將T細(xì)胞分成若干亞群:輔助性T細(xì)胞(Helper T cells,Th)、抑制性T細(xì)胞(Suppressor T cells,Ts)、效應(yīng)T細(xì)胞(Effector T cells,Te)、細(xì)胞毒性T細(xì)胞(Cytotoxic T cells,Tc)、遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)T細(xì)胞(Delayed type hypersensitivityT cells,Td)、放大T細(xì)胞(Ta),、原始的或天然T細(xì)胞(Naive T cells)、記憶T細(xì)胞(Memory T cell,Tm)。T細(xì)胞是淋巴細(xì)胞的主要組分,它具有多種生物學(xué)功能,如直接殺傷靶細(xì)胞,輔助或抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體,對特異性抗原和促有絲分裂原的應(yīng)答反應(yīng)以及產(chǎn)生細(xì)胞因子等,T細(xì)胞產(chǎn)生的免疫應(yīng)答是細(xì)胞免疫,細(xì)胞免疫的效應(yīng)形式主要有兩種:與靶細(xì)胞特異性結(jié)合,破壞靶細(xì)胞膜,直接殺傷靶細(xì)胞;另一種是釋放淋巴因子,最終使免疫效應(yīng)擴大和增強。

質(zhì)量檢測

CD3免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等

培養(yǎng)基

T淋巴細(xì)胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件

氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

換液頻率

2-3天換液一次

消化液

0.25%胰蛋白酶

細(xì)胞貨期

3-4周

發(fā)貨方式

復(fù)蘇發(fā)貨(免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用)

供應(yīng)范圍

僅限于科研實驗使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

特別說明

具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

收貨處理

取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)

傳代密度

細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)

傳代比例

首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法

 

1. 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;

3. 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4. 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。

三、注意事項

重要提醒

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。

到貨須知

1. 收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否完全揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

3. 由于運輸?shù)脑?,部分?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

4. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

四、售后服務(wù)

細(xì)胞予重發(fā)

1. 細(xì)胞運輸中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā)。

2. 收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)。

3. 收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā)。

4. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置2小時后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā)。

5. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā)。

6. 細(xì)胞活性問題,請在收到產(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā)。

細(xì)胞不重發(fā)

1. 客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā)。

2. 客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。

3. 非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。

4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。

5. 細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)。

6. 收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā)。

五、特別說明

上海紀(jì)寧生物客戶購買本公司的細(xì)胞過程中,有任何技術(shù)問題或?qū)嶒瀱栴},都可以撥打我們的免費服務(wù)電話15800441226 / 021-54721350,我們隨時給予技術(shù)中/實驗中的免費解答。

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