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人原代NK細胞

品牌:紀寧生物

貨號:JN-CC6079

規格: 5x10?cells/T25或1mL凍存管

聯系方式:021-54721350

立即詢價 說明書下載

產品詳情


一、細胞基本信息

細胞名稱

人原代NK細胞

細胞品牌

紀寧生物

細胞規格

5x10?cells/T25或1mL凍存管

種屬來源

組織來源

外周血

生長特性

懸浮生長

細胞形態

短梭形細胞樣

細胞簡介

自然殺傷細胞(natural killer cell,NK)是機體重要的免疫細胞,不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調節有關,而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發生。一種穩定表達在NK和LAK細胞表面的LAK-1分子,120kDa,NK細胞在IL-2條件下培養20天LAK-1仍為陽性,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失。LAK的殺傷活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。自然殺傷細胞刺激因子(natural killer cell stimulatory factor,NKSF) 對NK細胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白細胞調節素(leukoregulin,LR) 對NK細胞的活化和分化有正調節作用, 體外培養時加入上述細胞因子可明顯提高NK的殺傷活性。前列腺素 (PG)E1、E2、D2和腎上腺皮質激素等對NK細胞的活性有抑制作用。

 

質量檢測

CD56和CD16免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等

培養基

人原代NK細胞專用培養基

培養條件

氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

換液頻率

2-3天換液一次

消化液

0.25%胰蛋白酶

細胞貨期

現貨,2周左右

發貨方式

復蘇發貨(免運輸費用)/ 凍存發貨(需加干冰運輸費用)

供應范圍

僅限于科研實驗使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

特別說明

具體操作步驟以隨貨產品說明書為主

二、細胞培養操作

收貨處理

取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態

傳代密度

細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養

傳代代數

可傳5代左右;3代以內狀態為佳,建議收到細胞后盡快進行相關實驗

傳代比例

首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法

 

1. 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化;

3. 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;

4. 待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養基。

三、注意事項

重要提醒

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。

到貨須知

1. 收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,干冰運輸的細胞檢查干冰是否完全揮發,細胞是否解凍,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態 (所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。

3. 由于運輸的原因,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現象。個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

4. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

四、售后服務

細胞予重發

1. 細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發。

2. 收到細胞未開封,如出現污染狀況,重發。

3. 收到細胞3天內,發現污染問題,經核實后,重發。

4. 常溫發貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后,絕大多數細胞未存活,經核實后,重發。

5. 常溫發貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發貨的細胞復蘇2天后,出現污染,經核實后,重發。

6. 細胞活性問題,請在收到產品3天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經核實后,重發。

細胞不重發

1. 客戶操作造成細胞污染,不重發。

2. 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好,不重發。

3. 非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發。

4. 細胞狀態不好,未提供真實清晰的培養前3天的細胞狀態照片,不重發。

5. 細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發。

6. 收到細胞發現問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發。

五、特別說明

上海紀寧生物客戶購買本公司的細胞過程中,有任何技術問題或實驗問題,都可以撥打我們的免費服務電話15800441226 / 021-54721350,我們隨時給予技術中/實驗中的免費解答。

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